[发明专利]一种基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器有效
| 申请号： | 201710819041.7 | 申请日： | 2017-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN107505300B | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 于海东;宗丽君;李林;张承武;刘志鹏;刘金华;黄维;欧阳启然;赖琼宇;朱成显;焦钰翠;高磊 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/533 |
| 代理公司： | 32207 南京知识律师事务所 | 代理人： | 吴频梅 |
| 地址： | 210009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 荧光 免疫 分析 用量 作为 标记 检测 牛奶 诺氟沙星 流体 传感器 | ||
1.一种基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器，其特征在于：包括以下步骤：
(1)设计纸基模型，在色谱纸上，利用喷蜡打印机打印所需模型，所述设计纸基模型为亲水区域与疏水区域，亲水区域第一行为涂层区、第二行为二抗区，烘烤后，等离子体处理所述的纸基模型；
(2)诺氟沙星牛血清白蛋白NOR-BSA涂层抗原的制备；
(3)量子点标记的诺氟沙星NOR抗体的制备；
(4)配制不同浓度的NOR，并与步骤(3)中的量子点标记的诺氟沙星NOR抗体混合；
(5)在步骤(1)所得的色谱纸的涂层区加入步骤(2)制备的NOR-BSA，在步骤(1)所得的色谱纸的二抗区加入羊抗鼠二抗，反应15-30min后，用磷酸缓冲盐溶液PBS洗涤，用牛血清白蛋白BSA阻隔后再洗涤；
(6)将步骤(4)中的混合溶液加入到涂层区；反应2-5min后，将色谱纸对折，涂层区与二抗区重叠，再反应2-5min后洗涤；
(7)利用荧光分光光度计分别检测涂层区与二抗区的荧光。
2.根据权利要求1所述的基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器，其特征在于：所述步骤(1)的纸是通过喷蜡打印技术，形成亲水与疏水区域，在105℃下，烘烤5分钟，再用等离子体清洗器处理纸，通过得失电子，使纸上的羟基变为醛基，醛基再与抗原或者抗体的氨基反应，以此将抗原或抗体更好地固定在纸上。
3.根据权利要求1或2所述的基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器，其特征在于：所述步骤(1)的等离子体处理的所述纸基模型在加样前需要密封，防止氧化。
4.根据权利要求1所述的基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器，其特征在于：所述步骤(2)的涂层抗原是通过透析所得。
5.根据权利要求1所述的基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器，其特征在于：所述步骤(5)和(6)的加样和对折，是将NOR-BSA涂层抗原与羊抗鼠二抗分别到涂层区与二抗区中，反应15-30min后，用PBS洗涤，再加入BSA进行阻隔，15-30min后，用PBS洗涤，再将NOR与量子点标记的单克隆抗体混合物加入到涂层区，反应2-5min后，将涂层区与二抗区对折重叠。
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