[发明专利]一种能够特异性地结合PD-1的抗体及其功能片段

说明书

本发明涉及医学生物技术和人源化抗体改造研究领域，具体而言，涉及一种能够特异性地结合PD‑1的抗体及其功能片段，所述抗体及其功能片段包括PD‑1嵌合抗体及其功能片段及PD‑1人源化抗体及其功能片段。

技术领域

本发明涉及医学生物技术和人源化抗体改造研究领域，具体而言，涉及一种能够特异性地结合PD-1的抗体及其功能片段。

背景技术

程序性死亡受体-1(programmed death-1，PD-1)是近期炙手可热的免疫检查点(immune checkpoint)，主要参与T细胞的活化调控，可以调节免疫应答的强弱程度和持续时间。在正常情况下，PD-1可以介导和维持机体组织的自身免疫耐受，防止在炎症反应过程中免疫系统过度活化伤害自身组织，对避免自身免疫性疾病的发生具有积极作用；在病理情况下，其参与肿瘤免疫以及多种自身免疫病的发生发展过程(Anticancer Agents MedChem.2015；15(3):307-13.Hematol Oncol Stem Cell Ther.2014Mar；7(1):1-17.TrendsMol Med.2015Jan；21(1):24-33.Immunity.2013Jul 25；39(1):61-73.J ClinOncol.2015Jun 10；33(17):1974-82.)。

PD-1属于CD28家族成员，但不同于CD28家族其它成员如CTLA4能以二硫键形成共价二聚体，PD-1以单体形式存在。PD-1的结构主要包括胞外免疫球蛋白可变区样结构域、疏水的跨膜区和胞内区，其胞内区含有两个独立的磷酸化作用位点，分别为免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受体酪氨酸转移基序(ITSM)。PD-1主要诱导性表达于活化的T细胞表面，也表达于B细胞，NK细胞，单核细胞，DC细胞。PD-1的配体包括PD-L1(programmeddeath ligand 1)，PD-L2(programmed death ligand 2)，其配体属于B7家族，其中PD-L1诱导性表达于多种免疫细胞表面包括T细胞，B细胞，单核细胞，巨噬细胞，DC细胞，以及内皮细胞，表皮细胞等，而PD-L2仅诱导性表达于一些免疫细胞包括巨噬细胞，DC细胞，B细胞(Autoimmun Rev,2013,12(11):1091-1100.Front Immunol,2013,4:481.Nat Rev Cancer,2012,12(4):252-264.Trends Mol Med.2015Jan；21(1):24-33.)。

在肿瘤研究中发现，PD-L1高表达于多种肿瘤表面，包括黑色素瘤，肺癌，肾癌，乳腺癌，卵巢癌，宫颈癌，膀胱癌，食管癌，胃癌，胰腺癌，肠癌等，PD-L2高表达于B细胞淋巴瘤。肿瘤细胞通过高表达的PD-L1或者PD-L2，与T细胞上的PD-1结合，传递免疫抑制信号，会导致机体对肿瘤细胞免疫耐受，从而有利于肿瘤细胞的生长转移。PD-1配体的高表达与肿瘤患者的不良预后和耐药密切相关(Hematol Oncol Stem Cell Ther.2014Mar；7(1):1-17.)。而且研究还发现，PD-1上调表达于T细胞表面，尤其是浸润在肿瘤细胞中的T细胞表面，与不良预后也是密切相关(Trends Mol Med.2015Jan；21(1):24-33.)。

研发能阻断PD-1/PD-Ls信号通路的抗体来抗肿瘤是近期的一个热点。在临床上，PD-1/PD-Ls阻断抗体具有两个鲜明的特征：一是药效不局限于某一种肿瘤类型，而是在广谱的肿瘤中均有强而持久的抗肿瘤药效，随着越来越多的肿瘤类型进入临床评价之中，这个特点会得到更进一步的验证。二是这些抗体的安全性很好，不会发生一些化疗药和靶向药物常见的副作用譬如疲劳，白细胞降低，秃头，腹泻，皮疹等，而是只具有一些免疫相关的副作用。PD-1抗体nivolumab已上市用于治疗晚期的黑色素瘤、非小细胞肺癌和肾细胞癌，pembrolizuamb已上市用于治疗晚期的黑色素瘤、非小细胞肺癌。值得一提的是，目前PD-1/PD-Ls阻断抗体的良好抗肿瘤药效只能让小部分病患受益，多数患者有先天的耐药，或者发生继发性耐药(Oncology(Williston Park).2014Nov；28Suppl 3:15-28.)。