[发明专利]肉碱和葫芦巴碱的分离方法及其应用

权利要求书

1.一种肉碱和葫芦巴碱的分离方法，其特征在于，包含以下步骤：采用高效液相色谱法对肉碱和葫芦巴碱进行分离，即可；

所述的高效液相色谱法中的色谱柱为氨基色谱柱；

所述的高效液相色谱法中的流动相为缓冲溶液和极性有机溶剂；所述缓冲溶液为含有10mmol/L的甲酸铵水溶液。

2.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述氨基色谱柱是以化学稳定的、三键键合的酰胺基键合相的氨基色谱柱，例如XBridge Amide柱。

3.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述的高效液相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱时所述缓冲溶液和所述极性有机溶剂的体积比为10:90～45:55。

4.如权利要求3所述的分离方法，其特征在于，所述梯度洗脱中，所述流动相比例随时间的变化范围如表1所示：

表1

5.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述极性有机溶剂选自乙腈、甲醇和乙醇中的一种或多种，例如乙腈。

6.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述肉碱和葫芦巴碱样品以溶液形式存在；所述溶液中的溶剂选自水和/或醇类溶剂；例如，所述醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇中的一种或多种，例如甲醇。

7.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述的流动相的流速为0.5～1.5mL/min，例如0.6mL/min；

和/或，所述高效液相色谱法的进样量为1uL～5uL，例如2uL；

和/或，所述色谱柱的填料颗粒度为2.7μm～5μm，例如3.5μm；

和/或，所述色谱柱的长度为100mm～250mm，例如250mm；

和/或，所述色谱柱的柱温为25～60℃，例如35℃；

和/或，所述高效液相色谱法中的高效液相色谱仪为Thermo scientificDionex UltiMate 3000液相色谱仪。

8.一种如权利要求1～7任一项所述的分离方法在肉碱和葫芦巴碱的分析检测中的应用，其特征在于，包含以下步骤：将所述高效液相色谱法中的高效液相色谱仪与检测器联用，对肉碱和葫芦巴碱进行分析检测，即可。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述检测器为质谱检测器，例如三合一组合型高分辨质谱仪，再例如Thermo Scientific的OrbitrapFusion Lumos质谱仪。

10.一种如权利要求1～8任一项所述的分离方法在肉碱和葫芦巴碱含量测定中的应用。