[发明专利]IRAK-M多克隆抗体及其制备方法有效
申请号: | 201710828446.7 | 申请日: | 2017-09-14 |
公开(公告)号: | CN109504667B | 公开(公告)日: | 2022-12-20 |
发明(设计)人: | 邱亚峰;马志永;杜翔;魏建超;刘珂;李蓓蓓;邵东华 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;G01N33/573 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦;王卫彬 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | irak 克隆 抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一种猪源IRAK-M抗原,所述抗原为蛋白质,其特征在于,其氨基酸序列如序列表SEQID NO: 1所示。
2.一种编码氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示的蛋白质的核酸。
3.如权利要求2所述核酸,其特征在于,所述核酸的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO: 2所示。
4.一种载体,其特征在于,其含有编码氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示的蛋白质的核酸。
5.如权利要求4所述载体,其特征在于,所述载体为原核表达载体或真核表达载体。
6.如权利要求5所述的载体,其特征在于,所述原核表达载体为带有6个组氨酸标签的原核表达载体。
7.一种包含如权利要求4~6任一项中所述载体的转化体。
8.如权利要求7所述转化体,其特征在于,所述转化体为细菌或酵母。
9.一种IRAK-M多克隆抗体的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:以氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示的蛋白质为免疫原免疫动物,从所述动物中获得所述IRAK-M多克隆抗体。
10.如权利要求9所述制备方法,其特征在于,所述免疫原通过化学合成法或生物合成法获得。
11.如权利要求10所述的制备方法,其特征在于,所述生物合成法为在原核或真核体系中表达并纯化氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示的蛋白质。
12.如权利要求11所述的制备方法,其特征在于,所述纯化为在所述氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示的蛋白质C端添加6His标签后通过镍柱亲和层析纯化;所述原核体系为大肠杆菌表达体系;所述动物为哺乳动物。
13.如权利要求12所述的制备方法,其特征在于,所述哺乳动物为小鼠(
14.如权利要求9~13任一项所述制备方法,其特征在于,所述免疫动物的方法为多次免疫。
15.如权利要求14所述的制备方法,其特征在于,所述多次免疫为第一次免疫后间隔两周第二次免疫,然后每隔一周免疫一次,免疫五次。
16.如权利要求9所述制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括检测所述抗体。
17.如权利要求16所述的制备方法,其特征在于,所述检测的方法为选自Western杂交、免疫沉淀和免疫荧光中的一种或多种。
18.一种IRAK-M多克隆抗体,其特征在于,其是通过如权利要求9~17中任一项所述制备方法所制得的。
19.如权利要求18所述IRAK-M多克隆抗体在制备检测猪IRAK-M蛋白的试剂中的应用。
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