[发明专利]一种治疗前列腺增生的油菜花粉总甾醇及其制备方法

说明书

本发明涉及一种从油菜花粉中制备的治疗前列腺增生的总甾醇及其制备方法，油菜花粉总甾醇含量为75‑90%(wt%)，具体的甾醇成份及重量百分比为β‑谷甾醇10‑15%、菜油甾醇15‑20%、豆甾醇60‑70%和环阿屯醇2‑10%；其制备方法：以油菜花粉为原料，经超临界液体萃取、皂化和分子蒸馏纯化工艺制备而成。所制备的油菜花粉总甾醇成分确切，含量高，相关药效试验显示，该总甾醇明显降低前列腺增生大鼠的前列腺及背叶、腹叶的重量和体积，且疗效均优于前列康等现有技术产品，具有统计学意义；且其给药剂量明显降低，具有统计学意义。

(一)技术领域：本发明涉及一种中药提取方法，具体为一种从油菜花粉中制备高纯度甾醇提取物的方法。

(二)背景技术：前列腺是男性体内比较小的一个器官，成人仅类似栗子大小，但是几乎所有的成年男性一生中都会受其影响，最常见的前列腺疾病为前列腺炎和良性前列腺增生。其中，儿童较少发生前列腺疾病，青壮年和老年人发病率则较高，且随着年龄的不同，发生病种也不同；如前列腺炎好发于青壮年，35岁以上男子的发病率可达35％-40％；良性前列腺增生是常见的老年男性多发病，60-69岁的老年人发病率可达50-60％，70-80岁的老年人发病率则高达80％以上。

油菜蜂花粉(Brassica campestris L.bee pollen)是一种由蜜蜂采集花粉混合蜜蜂特殊的分泌物混合而成的一种天然物质，是我国来源最多的蜜源蜂花粉，年销售油菜蜂花粉上千吨，在药品、保健品中应用广泛。油菜蜂花粉主要成分为甾醇，还含有多糖、黄酮类化合物、脂类等多种成分，提取时需破壁且还需除去脂质杂质影响。

良性前列腺增生(Benign Prostatic Hyperplasia，BPH)是一种老年男性常见的生理病变，发病率日趋渐长，对老年男性的身体和心理健康构成了威胁。近年来国内外研究证明油菜花粉中的甾醇类物质具有较好的抗前列腺增生的功效，目前国内临床上已有普乐安、普适泰等多种花粉制剂(主要有效成分为甾醇)用于治疗前列腺疾病，虽具有临床治疗价值，但由于花粉中总甾醇等有效成分含量低，尤其是β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇和环阿屯醇等的含量几乎检测不到，导致患者日服量大，临床应用不方便。

故高效提取用于良性前列腺增生的油菜蜂花粉中总甾醇是目前研究的热点，已有诸多文献报道。如CN101569630A和CN101570560A分别公开了油菜花粉经超临界CO2萃取后过硅胶柱层析，有机溶剂洗脱得到24-亚甲基胆甾醇、花粉烷甾醇两个甾醇化合物和环按烯醇，两者的区别主要在于洗脱溶剂不同。上述两个专利采用了石油醚、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，存在污染产品和环境的难题，而且由于总甾醇属于不皂化物，其萃取后直接进行硅胶柱层析不利于甾醇类物质的快速制备纯化，故制得的总甾醇种类少，得率低。CN1660225A和CN103417597A分别公开了两种有机溶剂提取制备油菜蜂花粉有效部分及其制备方法，在柱层析有机溶剂洗脱基础上，再使用有机溶剂提取，不仅溶剂消耗量更大，初级萃取物杂质多，后续分离难度大和成本高，而且较多有机溶剂残留更难去除，增加溶剂去除成本的同时也给终端产品带来更多潜在安全风险。

也有文献报道采用超临界萃取、皂化提取总甾醇，如CN102411036A公开了松花粉超临界萃取、皂化提纯甾醇的方法，于95℃皂化回流3h，后经无水乙醚提取，得到的甾醇中主要成分为β-谷甾醇，占总含量的74％。该专利虽然采用超临界萃取+皂化提纯，但皂化温度高，回流时间长，效率低成本高，使用乙醚增加了潜在安全及环境污染风险，且仅对β-谷甾醇进行定量，并未明确总甾醇的其他有效成分及其含量。

陆柏益(竹笋中甾醇类化合物的研究——竹笋甾醇化学、工艺学及生物学功能[M].浙江大学，2007.60-88)通过采用超临界CO₂萃取竹笋甾醇，萃取压力为26.2MPa，萃取温度为43.4℃，CO₂流量为25.4L/h，萃取时间为2.5h，甾醇萃取率为(93.4±4.5)％，短程分子蒸馏后，总甾醇纯度约69％。油菜花粉中主要成分为甾醇，而竹笋中除含有甾醇外，还含有大量多糖、氨基酸和多肽。该工艺中未去除脂质成分的干扰，分离效率低，影响甾醇得率及纯度，不能大规模应用。