[发明专利]葫芦烷型三萜化合物的提取方法及抗阿尔兹海默症医药用途

权利要求书

1.一种葫芦烷型三萜化合物在制备抗阿尔兹海默症药物中的应用，其特征在于，所述葫芦烷型三萜化合物为化合物1-11，化合物1-11具有如下结构：

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2.一种葫芦烷型三萜化合物在制备抗阿尔兹海默症保健品中的应用，其特征在于，所述葫芦烷型三萜化合物为化合物1-11，化合物1-11具有如下结构：

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3.一种葫芦烷型三萜化合物的提取方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

（1）将苦瓜果实切成片，晒干后粉碎，置于甲醇中浸提1~5天，得浸提物；

（2）用乙酸乙酯和水对浸提物进行萃取，分别得到水层和酯层的粗提物，乙酸乙酯和水的体积比为1:1~3；

（3）对酯层的粗提物进行第一次分离纯化，得到目标馏分，以正己烷与丙酮、丙酮与甲醇溶剂系统作洗脱剂，采用硅胶开口柱对酯层的粗提物进行分离纯化；将正己烷与丙酮溶剂系统按体积比99:1、98:2、95:5、90:10、80：20、70:30、60:40、50:50、20:80、0:100依次洗脱，接着换用丙酮与甲醇溶剂系统按体积比50:50、0:100依次洗脱，获得的目标馏分，正己烷:丙酮=20:80；

（4）对目标馏分进行第二次分离纯化，得到目标馏分I~IV；以甲醇与水系统作洗脱剂，采用十八烷基键合硅胶开口柱对所述目标馏分进行分离纯化，将甲醇与水溶剂系统按照体积比60:40、70:30、75:25、80:20、90:10、100:0依次洗脱，获得目标馏分I~IV；

（5）对目标馏分I进行分离纯化得到化合物1-2，通过以下步骤：

a1) 以甲醇与水溶剂系统作洗脱剂，按照体积比70:30、73:27、75:25、77:23、80:20、83:17、85:15、100:0依次洗脱，采用十八烷基键合硅胶开口柱对目标馏分I进行分离，获得目标馏分；

a2) 将a1)所得目标馏分以二氯甲烷与甲醇溶剂系统作洗脱剂，按照体积比100:0、99:1、98:2、97.5:2.5、95:5、90:10、0:100依次洗脱，采用硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分;

a3) 对a2)所得目标馏分进行HPLC纯化，HPLC纯化条件如下：C30-UG-5 (10ID×250mm, Nomura Chemical)，流动相为乙腈:水=90:10，流速为3 mL/min，检测波长为210 nm，得到化合物1：1.0 mg，t_R=30.7 min和化合物2：4.6 mg，t_R=33.5 min，得到化合物1-2；

（6）对目标馏分II进行分离纯化得到化合物3-6，通过以下步骤实现：

b1) 以三氯甲烷与甲醇溶剂系统作洗脱剂，按照体积比100:0、98:2、95:5、90:10、0:100依次洗脱，采用硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分；

b2) 对b1)所得目标馏分以甲醇与水溶剂系统作洗脱剂，按照体积比70:30、75:25、80:20、90:10、100:0依次洗脱，采用十八烷基键合硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分；

b3) 对b2)所得目标馏分进行高效液相纯化，HPLC纯化条件如下：C30-UG-5 ，10ID×250 mm, Nomura Chemical，流动相为乙腈:水=62:38，流速为3 mL/min，检测波长为210nm，得到化合物3：10.6 mg，t_R=15.9 min，化合物4：1.8 mg，t_R=17.1 min，化合物5：1.9 mg，t_R=18.7 min和化合物6：3.2 mg，t_R=30.5 min，得到化合物3-6；

（7）对目标馏分III进行分离纯化得到化合物7-9，通过以下步骤实现：

c1) 先后以正己烷与三氯甲烷、三氯甲烷与甲醇溶剂系统作洗脱剂，按照体积比正己烷:氯仿=50:50、30:70、0:100；氯仿:甲醇=97:3、95:5、90:10、0:100，依次洗脱，采用硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分;

c2) 对c1)所得目标馏分进行高效液相纯化，HPLC纯化的条件如下：PAKC18，10ID×250mm, CAPCELL，流动相为乙腈:水=63:37，流速为3 mL/min，检测波长为210 nm，得到化合物7：10.2 mg，t_R=20.2 min，化合物8：4.9 mg，t_R=22.9 min和化合物9：1.3 mg，t_R=32.0 min，得到化合物7-9；

（8）对目标馏分IV进行分离纯化得到化合物10-11，通过以下步骤实现：

d1) 以三氯甲烷与甲醇溶剂系统作洗脱剂，按照体积比100:0、100:1、100:2、100:3、100:5、90:10、0:100依次洗脱，采用硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分；

d2) 对d1)所得目标馏分以甲醇与水溶剂系统作洗脱剂，按照体积比90:10、95:5、100:0依次洗脱，采用十八烷基键合硅胶开口柱进行分离，获得目标馏分；

d3) 对d2)所得目标馏分进行高效液相纯化，HPLC纯化的条件如下：PAKC18，10ID×250mm, CAPCELL，流动相为乙腈:水=60:40，流速为3 mL/min，检测波长为210 nm，得到化合物10：5.0 mg，t_R=28.7 min和化合物11：8.0 mg，t_R=33.8 min，得到化合物10和11；

所述化合物1-11的结构式如下：

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