[发明专利]一种促凝血女贞花多糖及其提取分离方法和应用有效
申请号: | 201710832923.7 | 申请日: | 2017-09-15 |
公开(公告)号: | CN107540756B | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 康文艺;尹震花;辛昕;张娟娟 | 申请(专利权)人: | 黄河科技学院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P7/04 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新;杨海霞 |
地址: | 450005 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 凝血 女贞 多糖 及其 提取 分离 方法 应用 | ||
1.促凝血女贞花多糖在制备促凝血药物方面的应用,其特征在于,所述促凝血女贞花多糖经下述步骤提取分离获得:
(1)新鲜的女贞花,阴干、粉碎,用石油醚回流脱脂,残渣挥干石油醚后,用乙醇浸提,所得残渣挥发至无醇味,再用超纯水加热提取,趁热抽滤,合并滤液后减压浓缩,再向浓缩液中加入乙醇,静置、离心,得到的沉淀加超纯水溶解透析以除去小分子杂质,透析液进行醇沉,得到的多糖沉淀冷冻干燥即得女贞花粗多糖;
(2)取除蛋白、脱色后的女贞花粗多糖,用超纯水溶解、过滤后加入到DEAE-52纤维素色谱柱,依次用超纯水、0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L 的NaCl溶液进行洗脱,洗脱液采用苯酚-硫酸法进行检测,测490 nm处的吸光度,以洗脱管数为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制洗脱曲线,合并同一洗脱峰的多糖样品,透析、浓缩后冷冻干燥;其中,0.1 mol/L NaCl溶液的洗脱峰为组分LL-1;
(3)组分LL-1用超纯水溶解、过滤后加入到Sephadex G-100凝胶色谱柱,用超纯水洗脱,采用苯酚-硫酸法进行检测,在波长490 nm处测其吸光度,以洗脱管数为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制洗脱曲线,得到两组洗脱峰,浓缩第2组洗脱峰,冷冻干燥得到的多糖命名为LLp-1b;LLp-1b含有D-半乳糖,LLp-1b即为促凝血女贞花多糖。
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