[发明专利]一种含有成纤维细胞生长因子10的胶原缓释水凝胶

说明书

本发明提供了人成纤维细胞生长因子10的胶原缓释水凝胶，其包括人FGF10和辅料，其中辅料包括胶原蛋白、泊洛沙姆407、甘油和海藻糖。

技术领域

本发明属于蛋白质或多肽药物技术领域，具体而言，本发明涉及成纤维细胞生长因子10的缓释水凝胶制剂。

技术背景

成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF10)是FGF家族的第10个成员，具有营养和保护神经元、促进损伤修复、诱导缺血区血管形成等功能，可显著加速急性损伤愈合。然而将FGF10应用于慢性炎性创面的修复时，效果并不理想(Sandborn WJ1,Sands BE,Wolf DC et al.Repifermin(keratinocyte growth factor-2)for thetreatment of active ulcerative colitis:a randomized,double-blind,placebo-controlled,dose-escalation trial.[J]Aliment Pharmacol Ther.2003,17(11):1355-64)。主要原因在于慢性创面存在炎症因子调控的细胞内环境，使成纤维细胞生长因子10很容易被细胞外蛋白酶降解而减弱其药理作用。因此，将FGF10应用在皮肤溃疡等慢性炎性创面，其效果受到极大影响。因此，如何有效地保护和缓慢释放生长因子成为临床上亟待解决的问题。

与合适载体材料结合，可以使生长因子免受蛋白酶水解，并在创面局部缓慢有效释放。温敏型水凝胶是一种常温下为液体，温度升高可以自动凝结为胶状的高分子材料，其在水中溶胀可保持大量水分并具有三维网络状结构。水凝胶因其结构与体内细胞外基质相似而被广泛应用于组织工程和药物控制释放的研究。泊洛沙姆是一类具有反向温度敏感特性的高分子材料，其黏度随着温度的升高而升高。通过调整链段比例能够得到溶液-凝胶温度范围在20～85℃的亲水凝胶。但是，以泊洛沙姆为母体制备温敏材料时，高浓度的泊洛沙姆往往具有一定的细胞毒性，因此可以产业化的温敏凝胶需要降低泊洛沙姆的使用量，并具有较低的胶凝温度。

本发明通过大量工作，筛选安全性能高的药用辅料泊洛沙姆为母体，利用胶原作为载药材料，以海藻糖作为稳定剂，从大量研究中发明了一种FGF10与胶原载体复合的泊洛沙姆温敏水凝胶制剂，可以有效减少泊洛沙姆的用量并且可使FGF10在三维空间环境中免受蛋白酶水解，在创面局部缓慢有效释放FGF10，对FGF10起到保护作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供可行的FGF10缓释水凝胶的制剂，其中包括FGF10蛋白，温敏凝胶基质泊洛沙姆407、药物载体材料胶原蛋白、蛋白保护剂甘油及海藻糖。

优选在本发明的制剂中，FGF10蛋白和胶原蛋白、泊洛沙姆407、甘油、海藻糖的重量比为0.1-1.0：1.8-5.0：15-25：0.5-5.0：0.2-2.0，其余成分为水。

另外也优选本发明的制剂还含有pH调节剂，优选含有10～20mM柠檬酸和柠檬酸钠。优选本发明的制剂的pH为5.0-6.6，优选为6.5。

本发明具有以下有益效果：水凝胶具有在35℃以下呈液态，在35℃立即凝固成固态凝胶的性质。在25℃储存3个月，FGF10的活性和纯度几乎没有改变，对细胞无毒性。

为了便于理解，以下将通过具体的附图、实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见的。另外，本发明引用了公开文献，这些文献是为了更清楚地描述本发明，它们的全文内容均纳入本文进行参考，就好像它们的全文已经在本文中重复叙述过一样。

附图说明