[发明专利]正骨水指纹图谱的构建方法及检测方法

说明书

本发明公开了正骨水的指纹图谱构建方法及其指纹图谱，该构建方法包括如下步骤：(1)供试品的制备：精密取正骨水，用乙醇水溶液稀释并定容，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；(2)精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得正骨水的指纹图谱。本发明经发明人的大量实验和研究，确定了制备供试品溶液的方法及高效液相色谱仪的色谱条件的最优参数，由此构建出正骨水的指纹图谱，并将其应用到正骨水的质量控制当中，从而保证了不同操作者、不同实验室多重复做出的指纹图谱都在允许的误差范围内，体现了所述指纹图谱的通用性、稳定性和实用性，能够全面、有效地对正骨水进行质量控制。

技术领域

本发明属于中药分析领域，涉及一种中药指纹的构建方法，特别是涉及一种正骨水指纹的构建方法及检测方法。

背景技术

基于中医药理论的中成药，药味组成比较繁多，一般是指将两味以上中药进行配伍组合并应用于疾病治疗的制剂。在制备过程中，不同成分之间可能相互发生反应，导致其成分更加复杂，所以准确检测其各有效成分的难度很大，如仅定性或定量的检测其中某个或某几个成分，由于信息量有限，难以体现中药组合物作为整体的化学特征。

正骨水是广西玉林制药集团有限责任公司自主研发的中成药，主要用于治疗跌打扭伤、骨折脱位及体育运动前后疲劳。该药由草乌、徐长卿、两面针、虎杖、碎骨木等26味中药组成，具有活血祛瘀、舒经活络、消肿止痛之功效。目前对正骨水的质量控制方法中，主要包括：(1)以降香对照药材、丹皮酚对照品、两面针对照药材进行薄层色谱鉴别；(2)以樟脑对照品、薄荷脑对照品进行气相色谱法鉴别；(3)以丹皮酚为对照品进行高效液相色谱法测定，其中每1ml正骨水含徐长卿按丹皮酚(C₉H₁₀O₃)计算，不得少于0.1mg。

正骨水的特定原料药以及制剂成分复杂多样，上述方法仅针对部分药材或成分进行表征与控制，具有一定的片面性，均不能全面的反应正骨水中有效化学成分，不足以对其进行有效的质量控制。

发明内容

基于此，针对上述问题，本发明提供了一种正骨水指纹图谱的构建方法，从而实现对正骨水主要化学成分的整体分析与有效表征，建立具备系统性、特征性、稳定性的正骨水质量控制方法。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种正骨水的指纹图谱的构建方法，该构建方法包括以下步骤：

(1)供试品的制备：精密取正骨水，以乙醇水溶液稀释并定容，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)高效液相色谱测定：精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到具有共有特征峰的正骨水指纹图谱。

在其中一个实施例中，步骤(2)中，高效液相色谱测定的色谱条件为：采用C₁₈键合硅胶色谱柱，柱温20℃～35℃，以乙腈为流动相A，0.1％-0.4％的甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流动相的流速为0.5-1.5mL/min，检测波长为270nm-290nm。

在其中一个实施例中，梯度洗脱中的，流动相A、B的变化设置如下：

0～15min，所述流动相A的体积百分比由5％变化至20％，所述流动相B的体积百分比由95％变化至80％；

15～45min，所述流动相A的体积百分比由20％变化至30％，所述流动相B的体积百分比由80％变化至70％；

45～75min，所述流动相A的体积百分比由30％变化至50％，所述流动相B的体积百分比由70％变化至50％；

75～90min，所述流动相A的体积百分比由50％变化至80％，所述流动相B的体积百分比由50％变化至20％；