[发明专利]一种用于检测山羊源性成分的试剂盒和方法在审
申请号: | 201710835384.2 | 申请日: | 2017-09-15 |
公开(公告)号: | CN109266756A | 公开(公告)日: | 2019-01-25 |
发明(设计)人: | 王巍;张敏;唐卓;梁恒兴;杜凤;段庆梓;陈浩东;吴文林;黄春燕;张彪;张玉;尚柯 | 申请(专利权)人: | 成都市食品药品检验研究院;中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 张娟;刘华玲 |
地址: | 610000 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 山羊 试剂盒 检测 成分检测 发明试剂 准确检测 灵敏度 肉制品 探针 引物 应用 | ||
本发明涉及包含SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.2所示引物对和SEQ IDNO.3所示探针的用于山羊源性成分检测的试剂盒,还涉及用于检测山羊源性成分的方法。本发明试剂盒及方法可以准确检测肉及肉制品中的山羊源性成分,检测快速、简便,成本低廉,特异性和灵敏度高,应用前景良好。
技术领域
本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种用于检测山羊源性成分的试剂盒和方法。
背景技术
近年来,伴随着肉类市场的急剧扩大,肉类掺假的事件频频发生,掺假的方式越来越多,形式越来越复杂,已成为全球食品行业的一个突出问题。肉制品掺假不仅会引起个体的健康风险,包括疾病感染、代谢紊乱、过敏反应等,而且更易引起经济、宗教、道德的问题。
目前,肉类掺假常见的检测技术有ELISA法、显微判定法、电子鼻法、质谱法等,但都存在灵敏度低、周期长、不能检测熟肉等缺点而未被广泛使用。PCR技术具有灵敏度高、操作简便、抗干扰能力强等优势,越来越多被用于动物源性成分检测。
陈永锋(陈永锋,饲料及动物性食品中山羊源性和绵羊源性成分双重荧光PCR检测方法的建立[J],福建畜牧兽医,2012,3:1-4)报道了一种通过双重荧光PCR方法检测山羊源性成分的方法,其结果中扩增曲线较差,无法确定对数增长期,无法保证结果的准确性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于检测山羊源性成分的试剂盒和方法。
本发明提供了SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物对、SEQ ID NO.3所示的探针。
本发明还提供了SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物对和SEQ ID NO.3所示的探针在制备检测山羊源性成分的试剂中的用途。
其中,所述试剂是检测肉及肉制品中山羊源性成分的试剂。
本发明还提供了一种用于检测山羊源性成分的试剂盒,它包括SEQ ID NO.1、SEQID NO.2所示的引物对和SEQ ID NO.3所示的探针。
其中,它还包括实时荧光PCR预混液。
其中,它还包括Taq DNA聚合酶、MgCl2、dNTP和反应缓冲液。
其中,所述试剂盒的组成为:
PCR反应总体积为20μL时,
其余为无菌双蒸水;
其中,模板DNA的浓度为1ng/μL~100ng/μL;引物的浓度为10μmol/L;探针的浓度为10μmol/L。
本发明还提供了上述试剂盒在用于检测肉及肉制品中山羊源性成分中的用途。
本发明还提供了一种检测山羊源性成分的方法,它包括如下步骤:
(1)提取样本DNA:取待检样品,提取其中的DNA;
(2)基因扩增:用上述试剂盒对待检样品中的DNA进行扩增;
(3)结果检测:对DNA扩增结果进行检测。
其中,所述待检组织为肉及肉制品。
综上,本发明试剂盒及方法可以准确检测山羊源性成分,特别适用于肉及肉制品中的山羊源性成分检测,检测快速、准确,成本低,特异性好,灵敏度高,有广泛的应用前景。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
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