[发明专利]一种单一聚合度几丁寡糖的制备方法

权利要求书

1.一种单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，首先使几丁质在溶剂中溶解或充分溶胀，在酸催化下匀相降解得到具有不同聚合度的几丁寡糖混合物，几丁寡糖混合物采用高效制备色谱进行分离纯化，制备出具有单一聚合度的几丁寡糖，单一聚合度几丁寡糖结构式如下：

其中，n＝1，2，3，4，5，6，7，8，9或10。

2.根据权利要求1所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)几丁质用粉碎机粉碎后分散于5倍至50倍质量的反应溶剂中，在强力搅拌下，使几丁质在反应溶剂中充分溶胀或溶解；

2)反应物在0℃～100℃保温1至10小时，几丁质在酸催化下匀相降解，聚合度随反应时间逐步降低，直至得到含有不同聚合度的几丁寡糖混合物溶液；

3)采用真空减压溶剂蒸发、醇沉及真空干燥、喷雾干燥或鼓风干燥除去反应溶剂，并干燥得到几丁寡糖混合物；

4)将几丁寡糖混合物溶解并过滤掉不溶解部分，然后采用高效制备色谱分离纯化；在不同时间段收集洗脱液，经除去洗脱液中的溶剂并干燥后，即制备出具有单一聚合度的几丁寡糖。

3.根据权利要求1或2所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，几丁质经漂洗烘干后，再采用粉碎机粉碎至80～200目。

4.根据权利要求1或2所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，溶解几丁质的溶剂为六氟异丙醇、六氟丙酮、二氯乙醇、含有氯化锂的二甲基甲酰胺、含有氯化锂的二甲基乙酰胺、N-甲基氧化吗啉、浓盐酸、浓硫酸、浓磷酸、甲基磺酸、甲酸、二氯乙酸、三氯乙酸中的一种或两种以上的混合物，溶剂用量为几丁质质量的5～50倍。

5.根据权利要求3所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，当采用弱酸性溶剂：六氟异丙醇、六氟丙酮、二氯乙醇、含有氯化锂的二甲基甲酰胺、含有氯化锂的二甲基乙酰胺、N-甲基氧化吗啉、甲酸、二氯乙酸、三氯乙酸的一种或两种以上时，通过加入盐酸或硫酸，以提高几丁质的降解速度，弱酸性溶剂中加入的盐酸或硫酸质量为溶剂质量的0.2～12％。

6.根据权利要求2所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，醇沉法采用的醇沉试剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异戊醇、丙酮、丁酮中的一种或两种以上。

7.根据权利要求2所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，高效制备色谱分离纯化步骤中，制备色谱分离纯化体系采用高效制备色谱动态轴向加压柱即DAC柱和亲水色谱填料，以有机溶剂和水混合作为流动相条件下进行分离纯化；

所使用的DAC柱内径为50～1000mm，所使用的亲水色谱填料采用硅胶表面极性基团键合相填料，硅胶表面极性基团键合相填料中极性基团包括：羟基、羧基、氨基、酰氨基、氰基中的一种或两种以上，硅胶表面极性基团键和相填料的粒径：5～100μm，孔径：比表面积：100～500m²/g。

8.根据权利要求7所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，流动相使用的有机溶剂为：乙腈、异丙醇、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、四氢呋喃中的一种或两种以上，采用有机溶剂和水混合作为洗脱液，有机溶剂和水的质量比例为：99.8/0.2～20/80。

9.根据权利要求7所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，制备色谱分离纯化体系即DAC柱系统中，流速为：0.1bv/min～0.6bv/min，UV检测为190～210nm，合格馏分收集方式为：按时间接取，固体载样量为：0.01％～5％。

10.根据权利要求7所述的单一聚合度几丁寡糖的制备方法，其特征在于，制备色谱分离纯化过程中，采用两种极性不同溶剂混合溶解样品，并使样品浓度为：10～1000mg/mL。