[发明专利]一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201710839851.9 | 申请日: | 2017-09-18 |
公开(公告)号: | CN107796941A | 公开(公告)日: | 2018-03-13 |
发明(设计)人: | 王卫华;黄晶晶;陈媛;张闻;周海滨 | 申请(专利权)人: | 宁波瑞源生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573;G01N33/92;G01N33/53 |
代理公司: | 宁波市鄞州盛飞专利代理事务所(普通合伙)33243 | 代理人: | 洪珊珊 |
地址: | 315020 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂蛋白 相关 磷脂酶 a2 测定 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括试剂R1、试剂R2A和试剂R2B,其中:
试剂R1由缓冲液、电解质、抑制剂、防腐剂组成,pH为7.0-7.5;
试剂R2A由缓冲液、抑制剂、保护剂、防腐剂组成,pH为2.5-6.0;
试剂R2B由缓冲液、脂蛋白相关磷脂酶A2底物、助溶剂、防腐剂组成,pH为7.0-7.5。
2.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,试剂R1、试剂R2A和试剂R2B中的缓冲液为碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、Tris缓冲液中的一种或多种,缓冲液的浓度为10-100mmol/L。
3.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,试剂R1和试剂R2A中抑制剂为1-壬烷磺酸钠或3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐,抑制剂的浓度为10-30mmol/L。
4.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,试剂R2A的保护剂为10-40%v/v的乙醇。
5.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,试剂R2B中的助溶剂为10-40%v/v的甘油。
6.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,试剂R1、试剂R2A和试剂R2B中的防腐剂为叠氮钠、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或多种,防腐剂的浓度为0.03-0.08%w/v。
7.根据权利要求1所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2的测定试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括校准品和/或质控品,校准品和质控品成分包括脂蛋白相关磷脂酶A2、缓冲液、电解质和稳定剂。
8.如权利要求1-7任一要求所述的一种脂蛋白相关磷脂酶A2测定试剂盒的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括:
在全自动生化分析仪上设置主波长为405nm,副波长为505nm;
将试剂R2A和试剂R2B以体积比为25-30:1的混匀,配成试剂R2;
将样本和试剂R1混匀后于35-40℃孵育3-5分钟,随即加入试剂R2,其中,样本、试剂R1和试剂R2的体积比为3:240:80,混匀后于35-40℃孵育60秒,读取吸光度A1,再孵育180秒后,读取吸光度A2,计算A2与A1的差值,根据校准曲线计算,得出样本中脂蛋白相关磷脂酶A2的活性。
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