[发明专利]用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器，其特征在于该传感器的建立在于对糖蛋白特异性亲和及选择性捕获的分子印记聚合物层和具有糖蛋白特异性亲和作用的SERS探针的组合；

所述分子印记聚合物层是通过以下方法制备得到的：取功能单体，交联剂，引发剂，致孔剂超声混匀15~25min，滴涂于玻璃片，70~75゜C反应1~2h合成聚合物骨架，然后以甲醇和蒸馏水分别冲洗；将制备的聚合物骨架浸入模板分子糖蛋白溶液中，随后用磷酸盐缓冲液洗涤，加入含有多巴胺和过硫酸铵的磷酸盐缓冲液；将模板分子固定的聚合物骨架置于3~5℃下10~12h，然后，用含有体积分数为25~35％乙腈的磷酸溶液洗涤得到分子印记聚合物层；

所述的功能单体、交联剂、引发剂和致孔剂的重量比为1.8~2.2：7.3~7.7 ：0.09~0.12：33~35；所述的模板分子浓度为0.10~0.12mg mL^-1，多巴胺的浓度为1.8~2.2mg mL^-1，过硫酸铵的浓度为9~10mM，所述的功能单体为4-乙烯基苯硼酸，交联剂为季戊四醇三丙烯酸酯，引发剂为2,2-偶氮二异丁腈，致孔剂为质量比为3:2的乙二醇和环己醇混合物；

所述SERS探针是通过以下方法制备得到的：将对巯基苯硼酸溶液加入到AuNPs胶体溶液中，室温下搅拌。

2.一种权利要求1所述的用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器的制备方法，其特征在于包括分子印记聚合物层的制备和SERS探针的制备；其中，分子印记聚合物层的制备步骤是在硼酸亲和聚合物骨架上固定模板分子糖蛋白之后，在聚合物骨架表面上通过多巴胺的自聚合来制备；SERS探针的制备是SERS探针用硼酸修饰；

所述的用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器的制备方法包括以下步骤：

a)分子印记聚合物层的制备：取功能单体，交联剂，引发剂，致孔剂超声混匀15~25min，滴涂于玻璃片，70~75゜C反应1~2h合成聚合物骨架，然后以甲醇和蒸馏水分别冲洗；将制备的聚合物骨架浸入模板分子糖蛋白溶液中，随后用磷酸盐缓冲液洗涤，加入含有多巴胺和过硫酸铵的磷酸盐缓冲液；将模板分子固定的聚合物骨架置于3~5℃下10~12h，然后，用含有体积分数为25~35％乙腈的磷酸溶液洗涤得到分子印记聚合物层；

b)SERS探针的制备：将对巯基苯硼酸溶液加入到AuNPs胶体溶液中，室温下搅拌；

其中，在步骤a) 中：所述的功能单体、交联剂、引发剂和致孔剂的重量比为1.8~2.2：7.3~7.7 ：0.09~0.12：33~35；所述的模板分子浓度为0.10~0.12mg mL^-1，多巴胺的浓度为1.8~2.2mg mL^-1，过硫酸铵的浓度为9~10mM，其中，功能单体为4-乙烯基苯硼酸，交联剂为季戊四醇三丙烯酸酯，引发剂为2,2-偶氮二异丁腈，致孔剂为质量比为3:2的乙二醇和环己醇混合物。

3.根据权利要求2所述的用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器的制备方法，其特征在于在步骤a) 中所述的模板分子为酸性磷酸酶，或转铁蛋白，或辣根过氧化物酶中的一种或多种。

4.根据权利要求2中所述的用于检测糖蛋白的基于分子印记聚合物的表面增强拉曼光谱传感器的制备方法，其特征在于在步骤b) 中所述的对巯基苯硼酸溶液中对巯基苯硼酸浓度为20~22μM，搅拌时间为60~70 min。