[发明专利]一株海洋冷杆菌及用其制备絮凝剂的方法有效
申请号: | 201710843126.9 | 申请日: | 2017-09-18 |
公开(公告)号: | CN107619802B | 公开(公告)日: | 2020-07-10 |
发明(设计)人: | 穆军;崔霞;杨桥 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/04;C02F1/56;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316022 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 海洋 杆菌 制备 絮凝 方法 | ||
1.一种用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其中所述海洋冷杆菌菌株GHF2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:中国,北京,中国科学院微生物研究所,保藏日期:2017年8月9日,保藏编号CGMCC No.:14509;包括以下步骤:
(1)将菌种接种到固体培养基上培养,然后加入无菌水制成菌种液;
(2)将菌种液接种到液体培养基中发酵培养制成发酵菌液;
(3)向发酵菌液中加入絮凝载体并继续发酵培养得到原料液;
(4)向原料液中加入乙醇静置沉降,然后离心分离沉降物,经干燥后制成絮凝剂;
其中1kg的液体培养基的组份如下:蛤肉汤30~50g、蛋白胨2~3g、磷酸氢二钾0.6~1.8g、硫代硫酸钠0.3~0.7g、柠檬酸铁铵0.5~1.1g和葡萄糖20~30g,余量为陈化海水;
步骤(2)中菌种液的接种浓度为0.8~1.4mL菌种液/100mL液体培养基,发酵培养的温度为18~23℃,培养时间3~5天;
步骤(3)中絮凝载体的加入量为5~10g/100mL发酵菌液,继续发酵培养1~3天。
2.根据权利要求1所述的用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其特征在于,固体培养基为向1kg的液体培养基中加入15~20g的琼脂凝固制成的斜面培养基。
3.根据权利要求1所述的用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其特征在于,步骤(1)中培养温度为18~23℃、时间36~48小时,无菌水与固体培养基的体积比为1.0~1.5:1。
4.根据权利要求1所述的用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其特征在于,步骤(2)中摇床转速为160~200r/min。
5.根据权利要求1所述的用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其特征在于,所述絮凝载体为沙土、泥沙、海沙、硅藻土、活性炭、贝壳粉、生物炭、壳聚糖和膨润土中的一种或几种,所述絮凝载体经200~300目筛网过筛后灭菌使用。
6.根据权利要求1所述的用海洋冷杆菌菌株GHF2制备絮凝剂的方法,其特征在于,步骤(4)中乙醇与原料液的体积比为2~4:1,在1~5℃静置6~10小时,离心速率3000~5000r/min,干燥温度为90~105℃,干燥时间1~2小时。
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