[发明专利]一种从银杏叶中提取精制高纯度银杏黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明阐述了从银杏叶中提取精制得到含有高纯度银杏黄酮提取物的方法

背景技术

银杏叶中所含的黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量、使冠脉和脑血管流量增加、抗心率失衡、软化血管、降血糖、血脂等作用；具有抑制血小板活化因子(APF)、促进血液循环及脑代谢等功能，用于治疗冠心病、心绞痛、哮喘、内毒素休克、器官移植排斥反应老年痴呆症和防治高血压、低血压、心脏病、动脉硬化、脑功能减退等多种疾病；同时，它还是一种天然抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基、抗衰老、增强机体免疫力的生理活性。有关银杏叶的有效成分及疗效的研究日益受到重视，已开发出保健品、化妆品、药品等多达100多种，形成国际市场上销售额20多亿美元的新兴产业。

目前提取银杏黄酮的主要方法有溶剂萃取法、金属络合沉淀法、膜分离、树脂法和超临界萃取等。①溶剂萃取法得到的产品的纯度有一定的局限性，如果使用卤代烃、甲苯和铅化物等有毒物质，则这些物质的残留会影响产品质量，而为了调整极性往往使用混合溶剂，溶剂回收比较困难，因此不利于保护环境、费用较高。张春秀等(张春秀，胡小玲，岳红.银杏黄酮类化合物的提取分离[J].应用化学,2001,18(4):338-339)采用乙基丁基酮作为萃取剂，设计了三因素四水平的正交实验，考察了温度、pH值、萃取时间、萃取次数等因素对萃取效果的影响。②金属络合沉淀法则容易造成金属离子残留，尤其是需要消耗大量能量回收解络剂，使得过程成本很高。张静(张静.银杏黄酮纯化及生物活性的研究[D].江南大学，2010.)采用了此方法，将银杏黄酮纯度提高到了55％；③膜分离技术分离能够取得较好的分离效果，同时能耗小、无污染，但膜的反复使用会造成膜污染、很不易清理，只有找到成本低、通量高的膜才能实现大规模生产。朱明行等(Zhu M H，Yun Y，Xiang W.Purification of ginkgo biloba flavonoids by UF membrane technology[J].Desalination & Water Treatment,2013,51(19-21):3847-3853)使用PES10KD膜得到较高纯度的银杏黄酮提取物，但并未表明其收率；④树脂法在国内精制银杏黄酮过程中应用广泛，取得了不错效果，但树脂易出现吸附性能显著下降的情况，其再生过程周期长、产生废液多，导致生产成本较高。吴梅林(吴梅林.银杏叶中活性成分提取分离与测定研究[D].中南大学,2005)采用AB-8树脂制得的银杏黄酮纯度大于24％；⑤超临界萃取技术由于设备造价高，一次性投资高，目前并没有得到广泛应用。张玉祥等(张玉祥，邱蔚芬.CO₂超临界萃取银杏叶有效成分的工艺研究[J].中国中医药科技,2006,13(4):255-256)使用超临界萃取方法所得的银杏黄酮纯度为27％。

与银杏黄酮提取分离方法相关的专利或申请有：⑴CN 102093326 A(《一种从银杏叶中提取精制银杏黄酮的方法》)：本发明涉及从银杏叶中提取精制银杏黄酮的方法，包括以下步骤：将干燥的银杏叶粉碎至30-40目，用含有细胞壁溶解酶的水在一定温度下浸泡银杏叶5-8h，然后煮沸提取银杏黄酮、离心水提液、用酸将离心液pH值调至4-6后，用大孔树脂分离纯化银杏黄酮。该专利使用的细胞溶解酶易失活，且不易重复利用；过程中用酸，造成废水处理困难，污染环境。

⑵CN 105175465 A(《一种提取银杏叶黄酮的方法》)：本发明为一种提取银杏叶黄酮的方法，包括如下步骤：①将银杏叶粉碎后进行索式提取，得到粗提物浸膏；②将步骤①所得的银杏叶粗提物浸膏放于离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，然后微波进行处理得到吸附完成的双水相溶液；③取步骤②上层清液，通过B-R缓冲液控制pH在3-6，用大孔吸附树脂常温静态进行吸附24h；④用蒸馏水冲洗大孔树脂，然后收集冲洗液，回收离子液体重复利用；并用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，最后得银杏黄酮产物。该专利中提取方法复杂，难以实现工业化大规模应用。

⑶CN105596382 A(《一种银杏提取物的提取工艺》)：本发明提供了一种银杏提取物的提取工艺，包括提取、浓缩、水沉、吸附、除酸和干燥步骤。本发明的提取工艺采用粉碎后的银杏叶浸入乙醇中进行提取，将提取液浓缩至无醇，稀释，并用冷沉离心法对稀释后的浓缩液进行处理，经过后续的D101树脂吸附、除酸、干燥工艺，得到纯度符合国家药典要求的银杏黄酮提取物。