[发明专利]植物抗干旱蛋白GmNARK及编码基因和应用有效

专利信息
申请号: 201710852589.1 申请日: 2017-09-20
公开(公告)号: CN107354140B 公开(公告)日: 2019-09-06
发明(设计)人: 蔡兆明;程春红;王殿东;李昌满;廖静静 申请(专利权)人: 长江师范学院
主分类号: C12N9/12 分类号: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/82;A01H5/00
代理公司: 重庆博凯知识产权代理有限公司 50212 代理人: 张先芸
地址: 408100 *** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 抗干旱 编码基因 分子设计 基因资源 蛋白 应用 干旱胁迫条件 农作物新品种 受体激酶蛋白 氨基酸序列 转基因植物 编码蛋白 耐旱作物 作物品种 植株 培育 大豆 改良 基因
【权利要求书】:

1.植物抗干旱蛋白GmNARK及编码基因的应用,其特征在于,将GmNARK的编码基因导入目的植物中,得到抗干旱提高的转基因植物;所述GmNARK基因的cDNA序列如SEQ IDNO.1 所示,其编码蛋白的氨基酸序列如 SEQ IDNO.2 所示。

2.根据权利要求1所述植物抗干旱蛋白GmNARK及编码基因的应用,其特征在于,所述转基因植物制备方法包括以下步骤:

1)GmNARK基因的获得:

以大豆品种的cDNA为模板,以GmNARK-OE-F 和GmNARK-OE-R 为引物,PCR扩增获得GmNARK基因;

所述引物GmNARK-OE-F 和GmNARK-OE-R的序列如下:

GmNARK-OE-F:CCCCCGGGATGAGAAGCTGTGTGTGCT;

GmNARK-OE-R:CGGGATCCCTAGAGATTAATTAGGTTGTGAG;

其中,GmNARK-OE-F的下划线序列为SmaI序列,GmNARK-OE-R的下划线序列为BamHI序列

2)重组表达载体的构建:

SmaI和BamHI双酶切步骤1)获得的GmNARK基因,回收GmNARK片段,克隆进经BamHI和SmaI双酶切的植物表达载体,得到重组表达载体pTF101-CAMV35S-GmNARK;

3)转基因植物的获得:

将步骤2)获得的重组表达载体pTF101-CAMV35S-GmNARK转化入农杆菌EHA101感受态细胞,得到GmNARK的农杆菌转化子,并进行植物遗传转化,再对植物进行反转录PCR鉴定,获得转基因植物。

3.根据权利要求1所述植物抗干旱蛋白GmNARK及编码基因的应用,其特征在于,所述目的植物为拟南芥。

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