[发明专利]一种副鸡禽杆菌的抗原蛋白及其应用

权利要求书

1.一种副鸡禽杆菌的抗原蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码如权利要求1所述抗原蛋白的编码基因，其特征在于，其核苷酸的序列如SEQ IDNO.2所示。

3.一种用于检测副鸡禽杆菌抗体的试剂盒，其特征在于，其含有如权利要求1所述的抗原蛋白用于样品中副鸡禽杆菌抗体水平的测定。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述与样品中抗体检测的测定的方法为ELISA法、蛋白质印迹法、胶体金免疫法或斑点杂交法。

5.一种用于检测副鸡禽杆菌抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含如权利要求1所述的抗原蛋白包被的ELISA板、样品稀释液、酶标记结合物、洗涤液和终止液。

6.如权利要求5所述的ELISA试剂盒，其特征在于，还包括阴性对照血清、阳性对照血清，所述阴性对照血清是SPF鸡血清，所述阳性对照血清是用如上所述的抗原蛋白接种健康鸡所得血清。

7.如权利要求5所述的ELISA试剂盒，其特征在于，所述ELISA板的制备方法包括如下步骤：将所述抗原蛋白用碳酸盐缓冲液稀释至1μg/mL，按100μL/孔加入至96孔包被板中，置于4℃过夜，洗涤液300μL/孔洗涤3次，每次3min，之后，加入5％脱脂乳的PBS溶液，37℃封闭1h，甩去封闭液。

8.如权利要求5的ELISA试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为含有1％的脱脂乳的PBS溶液，所述酶标记结合物为辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡酶标抗体；所述洗涤液为含有0.05％Tween 20的PBS溶液，所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。

9.一种副鸡禽杆菌的疫苗制剂，其特征在于，其含有如权利要求1所述的抗原蛋白，以及佐剂。

10.如权利要求9所述的疫苗制剂，其特征在于，所述抗原蛋白的终浓度为20μg/ml。