[发明专利]制备β-胡萝卜素的方法

权利要求书

1.制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：对种子阶段的三孢布拉氏霉菌正菌和三孢布拉氏霉菌负菌分别进行酶解处理后，再以一定比例混合进行发酵培养；收集发酵后得到的菌体，从菌体中提取β-胡萝卜素；所述的酶为果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶或脂肪酶其中的一种或二至四种任意混合形成的复合酶；所述酶活性为果胶酶10000-1000000U/g；纤维素酶10000-800000U/g；中性蛋白酶100000-1500000U/g；脂肪酶10000-200000 U/g。

2.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：种子阶段的三孢布拉氏霉菌正菌和三孢布拉氏霉菌负菌是在均匀的液体培养基中于摇瓶或发酵罐中培养的。

3.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：所述酶处理为将三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液分别在适宜三孢布拉氏霉菌生存的温度和pH范围内加入酶进行酶解处理。

4.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：酶处理时酶的用量为三孢布拉氏霉菌正菌种子液或三孢布拉氏霉菌负菌种子液菌体干重的0.1%-1%，酶解体系pH为5.0-7.5，酶解温度25-30℃，酶解处理时间为1-4小时。

5.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：所述的酶为果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶、脂肪酶按质量比为2-4：0-4：1-2：1-2的组合，酶用量为三孢布拉氏霉菌正菌种子液或三孢布拉氏霉菌负菌种子液菌体干重的0.05%-0.5%，酶解体系pH为5.0-7.5，25-30℃，酶解时间0.5-2h。

6.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：所述三孢布拉氏霉菌正、负菌种子液以三孢布拉氏霉菌正、负菌干菌体质量计，按质量比1:1-1:50混合后进行发酵培养。

7.根据权利要求1所述的制备β-胡萝卜素的方法，其特征在于：包括以下具体步骤：

（1）取三孢布拉氏霉菌正、负菌分开进行斜面培养；

（2）将步骤（1）斜面培养的三孢布拉氏霉菌正、负菌分开进行种子培养，和根据需要进行种子放大培养；

（3）将步骤（2）得到的三孢布拉氏霉菌正、负菌种子液采用酶处理，然后按照一定的比例混合，最后进行发酵培养；

（4）收集发酵后得到的菌体，从菌体中提取β-胡萝卜素。