[发明专利]一种适用于薰衣草的流式细胞术样品的制备方法及细胞裂解缓冲液

权利要求书

1.一种适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，其包括：

裂解步骤：将薰衣草组织样品进行裂解处理、过滤处理、离心处理，得到待染色的细胞核；

染色步骤：对所述待染色的细胞核进行染色处理，得到染色的细胞核。

2.根据权利要求1所述适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述薰衣草为法国薰衣草。

3.根据权利要求1或2所述的适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述薰衣草组织样品为薰衣草叶片。

4.根据权利要求1或2所述的适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述裂解步骤的裂解处理中，采用的细胞裂解缓冲液包括如下组分：0.1-0.2mol/L Tris-HCl，5-15mmol/L氯化镁，1-3mmol/L乙二胺四乙酸二钠，70-90mmol/L氯化钠，10-20mmol/L焦亚硫酸钠，1.5-3.0％(w/v)聚乙烯吡咯烷酮，0.5-1％(V/V)聚乙二醇辛基苯基醚，4-6mmol/L二硫苏糖醇；pH值为7.4-7.6。

5.根据权利要求4所述的适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述细胞裂解缓冲液包括如下组分：0.2mol/L Tris-HCl，10mmol/L氯化镁，2mmol/L乙二胺四乙酸二钠，80mmol/L氯化钠，10mmol/L焦亚硫酸钠，2％(w/v)聚乙烯吡咯烷酮，1％(V/V)聚乙二醇辛基苯基醚，5mmol/L二硫苏糖醇；pH值为7.5。

6.根据权利要求1或2所述的适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述裂解步骤的离心处理中，转速为500-2000r/min，温度为4℃，时间为3-10分钟。

7.根据权利要求6所述的适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于，所述裂解步骤的离心处理中，转速为1000r/min，温度为4℃，时间为5分钟。

8.根据权利要求1或2所述适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于：所述染色步骤的染色处理中，采用的染色液包括如下组分：50μg/ml的RnaseA和50μg/ml的碘化丙啶。

9.根据权利要求1或2所述适用于薰衣草的流式细胞术样品制备方法，其特征在于：所述染色步骤的染色处理中，将所述待染色的细胞核中加入染色液后混匀，在于4℃黑暗处放置5-30分钟。

10.一种用于制备薰衣草流式细胞术样品的细胞裂解缓冲液，其特征在于，其包括如下组分：0.1-0.2mol/L Tris-HCl，5-15mmol/L氯化镁，1-3mmol/L乙二胺四乙酸二钠，70-90mmol/L氯化钠，10-20mmol/L焦亚硫酸钠，1.5-3.0％(w/v)聚乙烯吡咯烷酮，0.5-1％(V/V)聚乙二醇辛基苯基醚，4-6mmol/L二硫苏糖醇；pH值为7.4-7.6。