[发明专利]一种鉴别多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记引物及方法

权利要求书

1.一种鉴别多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记引物，其特征在于所述引物序列为：

L5979：5’-TTTAGTATTCGGAGCCTGAG-3’；

H6241：5’-CCTCAACACCTGATGAGGCC-3’。

2.一种利用权利要求1所述分子标记引物进行鉴别多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的方法，其特征在于所述的方法包括：

提取多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的DNA，以两种鱼的DNA为模板进行PCR扩增，对扩增结果进行纯化、测序，比对测序结果，种内遗传差异不大于1%；

所述多鳞鱚隐存种的分子标记序列为：

CAGGCATGGTGGGCACGGCCCTGAGCTTGCTAATCCGAGCAGAACTCAGCCAGCCCGGCGCTCTACTCGGTGATGACCAGATTTATAATGTTATTGTCACTGCACATGCTTTCGTAATGATTTTCTTTATAGTAATACCAATCCTCATCGGAGGATTTGGGAACTGACTCGTACCCCTAATGATTGGGGCCCCCGACATAGCATTCCCACGAATGAATAACATGAGCTTCTGACTTCTCCCTCCTTCTTTCCTTCTTCTTTT；

所述多鳞鱚的分子标记序列为：

CAGGTATGGTGGGCACGGCCCTAAGCCTGCTTATCCGAGCAGAACTTAGCCAACCTGGCGCTCTGCTTGGTGACGACCAAATTTACAATGTCATTGTCACCGCACATGCCTTTGTAATAATTTTCTTTATAGTAATGCCAATCCTTATCGGAGGGTTCGGCAACTGGCTTGTTCCCCTGATGATCGGAGCCCCTGATATGGCATTCCCACGAATGAATAACATGAGCTTCTGACTCCTTCCTCCTTCTTTCCTCCTTCTCTT。

3.根据权利要求2所述的鉴别多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的方法，其特征在于所述PCR扩增的反应体系组成为：超纯水17.5ul，10×buffer 2.5ul，dNTPs 2ul， rTaq 0.15ul ，DNA模板1ul，Primer各1ul；

所述的PCR扩增程序为94℃预变性5min，然后94℃变性45sec，50℃退火45sec，72℃延伸45sec，进行35 个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存∞。