[发明专利]一种附子汤的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及附子汤技术领域，更具体而言，涉及一种附子汤的提取方法。

背景技术

附子汤由附子、茯苓、人参、白术、芍药组成，首次出现于张仲景《伤寒论•辨少阴病脉证并治篇》，具有温经助阳、祛寒除湿之功效。《伤寒论》304条云：“少阴病，得之一二日，口中和，其背恶寒者，当灸之，附子汤主之”。305条又指出：“少阴病，身体痛，手足寒，骨节痛，脉沉者，附子汤主之”。方中附子益火兴元阳，温经散寒；人参大补元气，生化气血；茯苓健脾利湿，兼益心气；白术益气健脾，祛寒除湿；芍药养营和血以益肝阴。以附子为君药，人参为臣药，并以白术茯苓芍药辅佐，配伍得当，是治疗整体阳虚寒湿的经典方剂。古代医家运用附子汤多用于治疗脾肾阳虚、寒湿停聚、少阴阳虚方面。现代临床多用于心衰、心悸、风寒湿痹、腹痛、水肿等病，涉及到了心血管系统，寒湿痹证等多个方面。

现在有不少关于附子汤的提取条件和测定方法的报道，他们采用了不同的料液比、不同的提取方法和不同的提取溶剂等，但是这些提取方法各异，从而使含量测定结果有较大的差异。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种附子汤的提取方法，该方法使用单因素结合正交试验法，利用回流提取法对附子汤进行提取研究，获得一种附子汤的最佳提取方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：

一种附子汤的提取方法，包括以下步骤：

（1）取附子汤中各味药材，进行单因素试验，得出各因素对附子汤各成分提取效果的影响；

（2）进行正交试验，根据附子汤中各成分总峰面积的大小，确定提取条件；

（3）取与步骤（1）附子汤中等量的各味药材，按上述确定的提取条件加入乙醇溶液；

（4）将所得溶液加热回流提取；

（5）重复步骤（4）提取；

（6）将所得滤液合并，得到包含附子汤中各成分的提取液。

所述步骤（1）中，附子汤中各味药材为：黑顺片15g，茯苓9g，白术12g，白芍9g，人参6g。

所述步骤（1）中，单因素包括料液比、乙醇体积分数、提取时间和提取次数。

采用单因素试验，试验结果为采用1:5-1：20的料液比，体积分数为50%-90%的乙醇、提取时间为1h-3h，提取次数为1-3次时，各因素提取效果影响较大。

步骤（2）中，正交试验具体是指根据单因素试验结果，在每个因素下各选出3个水平，制定因素水平表，采用正交表L₉(3⁴)进行试验，根据各因素的极差值，确定各因素分别对附子汤中各成分的提取效果影响，得到最佳提取条件。

确定提取条件为采用1:10的料液比、体积分数为70%的乙醇溶液，回流提取时间为2h，提取2次。

步骤（1）中的单因素试验和步骤（2）中的正交试验，均使用高效液相色谱对包含附子汤各成分的提取液进行测定，从而比较各提取条件的优劣。

高效液相色谱中的高效液相色谱柱色谱通过BDS HYPERSIL C₁₈色谱柱测得，BDS HYPERSIL C₁₈色谱柱色谱柱长：250mm，内径：4.6mm，填料粒径：5μm；流动相A：乙腈；流动相B：PH=9的乙酸铵溶液，浓度为0.04mol/L；流速：1ml/min^-1；检测波长：240nm；进样量：10μl；检测温度：30℃。

高效液相色谱测定附子汤各成分的含量包括以下步骤：

（1）将包含有附子汤各成分的提取液用纱布过滤，用旋蒸仪将滤液旋转蒸发浓缩至近干，再用0.05%盐酸-甲醇溶液溶解残渣，并定容至10ml，用微孔滤膜滤过即得供试品溶液；

（2）取供试品溶液注入高效液相色谱中进行色谱分析，总峰面积越大，附子汤中各成分的相对含量越高。

所述步骤（1）中，微孔滤膜的孔径为0.45μm。

与现有技术相比，本发明所具有的有益效果为：

本发明以附子汤原方为研究对象，采用单因素结合正交试验法，优选出提取附子汤各成分的最佳方法：料液比为1：10时，附子汤中的化学成分完全扩散在溶剂中；乙醇体积分数为70%时，有效成分提取率最高；提取时间为2h、提取次数2次都可以使有效成分充分被提取，综合得到使附子汤各成分含量相对较高的提取方法，也为附子汤的综合利用提供实验依据。

附图说明

图1为附子汤的高效液相色谱图；

图2为料液比对总峰面积大小的影响；