[发明专利]清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及药品中异槲皮苷的含量测定方法，尤其涉及清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法。

背景技术

清浊祛毒丸是广西壮族民间治疗前列腺疾病、泌尿生殖系统疾病的效验方药，是我公司的拳头产品(国药准字Z20025347)拥有自主知识产权、是广西民族药、获国家处方发明专利(专利号ZL200410015042.9)，能清热解毒、利湿祛暑，用于治疗湿热下注所致尿频、尿急、尿痛等。清浊祛毒丸的中的主要原料药材为金沙藤，金沙藤的主要有效成分为异槲皮苷，原标准中没有中异槲皮苷的测定方法，为了使本产品有更好的质量控制方法，保证药品质量。我们对清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法进行了研究，通过反复试验制定了清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法。

发明内容

本发明的目的是提供清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法，包括以下步骤：

(1)制备标准溶液：精密称取异槲皮苷标准品加甲醇制成标准溶液；

(2)制备样品溶液：精密称定清浊祛毒丸，研细后置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中，蒸干，残渣加水使溶解，加水定量至25ml，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置于大孔吸附树脂柱上，用水洗脱，弃去水溶液，再用50％乙醇洗脱，弃去前10ml初洗脱液，收集续洗脱液约48ml，然后加50％乙醇定量至50ml，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得样品溶液；

(3)测定：分别取标准溶液和样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得异槲皮苷(C₂₁H₂₀O₁₂)含量。

所述步骤(1)中，标准溶液的异槲皮苷浓度为每1ml含20μg。

所述步骤(2)中，清浊祛毒丸与甲醇质量体积比为1:200(g/ml)；超声处理的功率500W，频率40kHz，处理时间30-60分钟。所述大孔细粉树脂为D101型大孔吸附树脂柱，内径1.5cm，长10cm；洗脱用水100ml。

所述步骤(3)中，液相色谱的条件如下：色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈:四氢呋喃:0.2％磷酸水溶液＝15:4:81(V/V)，检测波长为270nm，理论板数按异槲皮苷峰计算应不低于3000。

本发明提供的清浊祛毒丸中异槲皮苷的含量测定方法是经过了不同样品提取条件、方法学考察及样品的测定、线性关系考察、精密度试验、重复性试验、稳定性试验，精选出最合适的异槲皮苷含量测定方法。其精密度、重复性好，线性关系优异，测定结果稳定，能够有效、准确地测定清浊祛毒丸中异槲皮苷含量，使得清浊祛毒丸的质量可获得全面控制。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例，凡是不背离本发明构思的改变或等同替代品均包括在本发明的保护范围之内。

实施例1

(1)取异槲皮苷标准品适量，精密称定，加水制成每1ml含20μg的标准品溶液。

(2)取本品20丸，精密称定，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中，蒸干，残渣加水使溶解，转移至25ml量瓶中，并加水至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置已处理好的D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长10cm)上，用水100ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇洗脱，弃去前10ml初洗脱液，收集续洗脱液约48ml，置50ml量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

(3)分别精密吸取标准品溶液和待测样品溶液各10μl，注入液相色谱仪。色谱条件：色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相：乙腈:四氢呋喃:0.2％磷酸水溶液＝15:4:81(V/V)，检测波长为270nm，理论板数按异槲皮苷峰计算应不低于3000，测定本品按干燥品算，含异槲皮苷(C₂₁H₂₀O₁₂)不得少于6.0mg/g。