[发明专利]一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基。

背景技术

花青素是最著名的天然色素，广泛地存在于植物界，呈现多种赏心悦目的颜色。花青素又称“花色素”，是一种水溶性的植物色素。从广义上看，花青素属于黄酮类化合物，存在于液泡内的细胞液中。花青素不但含于花中，亦含于根(如红萝卜)、叶(如紫苏、红叶)、果皮(如茄子、葡萄)及种皮(如黑豆)等部分中。花青素的种类甚多，但具有相同的基本骨架。花青素的基本结构母核是α-苯基苯并吡喃，由于其上的取代基及取代基的位置不同，就形成了形形色色的花青素。花青素的颜色因酸碱度不同而异，在酸性条件下呈红色，在碱性条件下为蓝色。花青素的颜色会随pH而改变，此外还受K⁺、Na⁺和其它金属离子的影响。花青素在植物中常以糖苷形式存在，称为花青(素)苷或花色(素)苷。

花青素苷具有鲜艳的色泽，可以用作天然食用色素，作为食品、化妆品及药品的着色剂；现已证明花青素能够防止脂过氧化反应，为过氧化物阳离子和一氧化氮的清除剂。花青素苷还有抗突变、减轻肝机能障碍、降低胆固醇含量等生理功能，也可以入药，用于治疗多种疾病。随着国际社会对人类健康的日益重视，越来越多的人工合成色素因其有不同程度的毒性，并对生态环境造成一定危害而被禁用。花青素苷作为一种天然食用色素，不仅具有安全、无毒的优点，而且具有一定的营养和药理作用，在食品、化妆、医药方面有着巨大的应用潜力。

花青素苷在天然栽培植株中的含量相对较少，直接提取不仅成本大，而且会造成植物资源的掠夺性开发，破坏生态平衡和植物资源的多样性。用植物细胞培养技术生产花青素的技术较种植法有许多优点，如生产周期短、无任何限制、无污染等，还能够大幅度的提高产量，并且品质良好。因此，发展适合植物细胞中花青素苷累积的培养基对于生产花青素苷具有非常重要的现实意义。

发明内容

为了生产花青素苷，本发明的目的是提供一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基。本发明的培养基营养丰富，配比合理，能够促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，适于工业化生产花青素苷。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，包括：

优选地，所述培养基的pH值为5.6-6.2。

优选地，所述KNO₃和(NH4)₂SO₄的摩尔比为19-25：2-8。

本发明的有益效果：本发明的培养基配比合理、营养丰富。通过调节作为氮源的硝酸钾和硫酸铵的比例，本发明的培养基能够明显促进穗冠花下胚轴愈伤组织中花青素苷的积累。此外，本发明的培养基适于在工业上大规模应用，能够实现花青素苷的产业化生产。

具体实施方式

实施例1

一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，包括以下重量份计的组分：

一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，包括：

实施例2

一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，包括：

实施例3

一种促进愈伤组织中花青素苷累积的培养基，包括：

分别在实施例1-3中的培养基中培养穗冠花下胚轴愈伤组织，具体操作为：取1g色泽鲜艳舒松的新鲜愈伤组织，在超净工作台上用镊子小心地放入培养基中。每16天继代一次。15天后，取1g鲜重培养的愈伤组织，放入10ml的离心管中，加入5ml 1％的盐酸甲醇溶液，在4℃浸泡抽提4小时，持续搅动以使抽提彻底。将抽提的细胞悬浮液离心，将上清液倒入比色杯，在波长为530nm和657nm处测光密度值A，通过以下公式计算花青素苷在530nm处的实际光密度值A_校。A_校＝A₅₃₀-0.25A₆₅₇，以A_校表示愈伤组织的花青素苷含量，结果列在表1中。

表1在不同培养中培养后愈伤组织中花青素苷的含量