[发明专利]一种骨髓间充质干细胞储存液有效
申请号: | 201710877524.2 | 申请日: | 2017-09-26 |
公开(公告)号: | CN107410289B | 公开(公告)日: | 2018-08-24 |
发明(设计)人: | 张丹丹;杨勇;胡志香 | 申请(专利权)人: | 恩大细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 深圳市兰锋知识产权代理事务所(普通合伙) 44419 | 代理人: | 曹明兰 |
地址: | 518000 广东省深圳市福田区福保街道福*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人参皂苷 骨髓间充质干细胞 储存液 小时存活率 生理盐水 有效浓度 存活率 存储 制备 | ||
本发明涉及一种骨髓间充质干细胞储存液,溶液为0.9%生理盐水,溶液中还含有有效浓度的人参皂苷RZ1。本发明提供的储存液可以最大限度地维持骨髓间充质干细胞的存活率,存储12小时存活率的下降百分比可以控制10%以内,显著优于不含有人参皂苷RZ1的0.9%生理盐水;另外,若再添加有效浓度的人参皂苷RG5,存储12小时存活率的下降百分比可以控制5%以内。因此,人参皂苷RZ1可以用于制备骨髓间充质干细胞储存液,人参皂苷RG5可以进一步增强人参皂苷RZ1对骨髓间充质干细胞存活率的维持效果。
技术领域
本发明涉及干细胞储存,尤其涉及一种骨髓间充质干细胞储存液。
背景技术
骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植可以用于脊髓损伤等疾病的治疗,对损伤的脊髓进行骨髓间充质干细胞移植后发现,BMSCs可以促进损伤部位轴突再生和运动功能的恢复。
BMSCs在移植前,均需要从其扩增的培养瓶中进行收集,再用非培养基的溶液制成细胞悬液以供移植。在进行动物模型实验时,我们会在最短的时间内将重悬的干细胞进行移植。但是,在临床治疗中,将重悬的细胞立即进行移植是不可行的。细胞收集,外科手术及长距离的运输干细胞都可能会增加移植等待的时间。因此,新鲜干细胞在移植前需要进行一定时间的存储。为了便于移植,先以细胞悬液的形式进行短时间的存储,即短时的存储液亦是收集细胞时所用到的溶液。目前,在干细胞移植研究中,常用的细胞收集溶液有0.9%生理盐水、0.01M磷酸盐缓冲液(PBS),两种存储液常被用来提取、收集、检测和存储。
但是,BMSCs使用0.9%生理盐水或0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)存储效果一般,存储12小时存活率下降20-30%左右。
人参皂苷RZ1是从蒸制三七中分离得到的一种稀有人参皂苷,其与同样从蒸制三七中分离得到的另外两种稀有人参皂苷RK1、RG5为同分异构体(化学结构式如下)。已有研究发现这三种稀有人参皂苷具有多种药理作用,而且这三种稀有人参皂苷虽然结构非常相似(仅仅为双键位置不同或双键两端的基团顺反式不同),但是药理作用差异较大。
目前尚未见人参皂苷RZ1或RG5用于保存BMSCs以最大限度保持其存活率的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供提供一种骨髓间充质干细胞储存液。
为实现上述目的,本发明提供了以下技术方案:
一种骨髓间充质干细胞储存液,溶液为0.9%生理盐水,溶液中还含有有效浓度的人参皂苷RZ1。
优选地,人参皂苷RZ1质量浓度优选20-40mM。
优选地,还含有有效浓度的人参皂苷RG5。
优选地,人参皂苷RG5质量浓度优选5-15mM。
人参皂苷RZ1用于制备骨髓间充质干细胞储存液的用途。
优选地,所述储存液中还含有有效浓度的人参皂苷RG5。
本发明的优点:
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