[发明专利]一种五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的含量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种对五指毛桃中补骨脂素和芹菜素同时进行检测的含量测定方法。

背景技术

五指毛桃为桑科植物粗叶榕Ficus hirta Vahl.的干燥根^[1]，具有健脾补肺、行气利湿、舒筋活络之功效，主治脾虚浮肿、食少无力、肺痨咳嗽、盗汗、带下、产后无乳、风湿痹痛、水肿、肝硬化腹水、肝炎、跌打损伤等。五指毛桃主要含补骨脂素、β-谷甾醇、β-胡萝卜苷、十六酸、十八酸、芹菜素、木犀草素等化合物^[2,3]，其中补骨脂素和芹菜素为其主要有效活性成分^[4,5]。

现代研究表明补骨脂素具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤、免疫调节等作用^[6]。芹菜素是一种常见的黄酮类化合物，药理作用广泛，体外及动物实验研究发现芹菜素对多种肿瘤具有预防、治疗或化疗增敏作用；对多种原因导致的骨、前列腺、肝脏、眼等组织、器官的病变具有防护作用,对中枢神经系统病变亦具有一定的预防作用；对雌性和雄性大鼠的生殖系统的内分泌功能具有明显影响；此外，芹菜素还具有抗菌、抗病毒、抗过敏、抗氧化、防护辐射损伤及调节分化等作用^[7]。

五指毛桃含量测定的研究中，可以采用梯度洗脱的方法同时对补骨脂素和芹菜素进行含量测定，但此方法操作比较复杂，浪费流动相。

发明内容

本发明的目的是提供一种五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的质量检测方法。利用高效液相色谱法，双波长对其有效成分补骨脂素和芹菜素进行测定，使补骨脂素和芹菜素能够在最佳的流动相、最大吸收波长条件下得到最精确的检验。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备；

(2)用高效液相色谱法双波长同时测定补骨脂素和芹菜素的含量，所述流动相为甲醇-2％磷酸，其体积比为60∶40。

步骤(1)中，称取五指毛桃样品，加入乙醇，超声处理，过滤，取滤液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，即得供试品溶液。

步骤(1)中，超声处理的时间是30min，水浴蒸干的温度是60～70℃。

步骤(2)中所述检测补骨脂素的波长是245nm，所述检测芹菜素的波长是338nm。

步骤(2)中所述高效液相色谱法所用高效液相色谱仪的型号是Agilent 1100系列。

步骤(2)中所述色谱柱为C18柱，其型号是250mm×4.6mm，5μm。

步骤(2)中所述检测流速为1mL·min^-1。

步骤(2)中所述检测温度为30℃。

本发明具有如下有益效果：

(1)本发明的检测准确度高、灵敏度高、重复性好。补骨脂素在0.01045～0.1045mg·mL^-1的浓度范围内，与峰面积呈良好的线性关系。芹菜素在0.0113～0.113mg·mL^-1的浓度范围内，与峰面积呈良好的线性关系。补骨脂素平均回收率为98.63％，RSD为1.8％(n＝6)，芹菜素的平均回收率为100.59％，RSD为1.6％(n＝6)。

(2)本发明是一种简便的方法，使用等度洗脱，不需要使用梯度洗脱，高效、方便、经济，可以用于五指毛桃的质量控制。

(3)本发明方法可以适用于不同的高效液相色谱仪，摆脱大多数定性定量检测方法对特定色谱仪的依赖，说明此方法适用范围广。

附图说明

图1是补骨脂素全波长扫描。

图2是芹菜素全波长扫描。

图3是实施例1补骨脂素对照品色谱图(245nm)。

图4是实施例1五指毛桃色谱图(245nm)。

图5是实施例1芹菜素对照品色谱图(338nm)。

图6是实施例1五指毛桃色谱图(338nm)。

图7是实施例2补骨脂素对照品色谱图(245nm)。

图8是实施例2五指毛桃色谱图(245nm)。

图9是实施例2芹菜素对照品色谱图(338nm)。

图10是实施例2五指毛桃色谱图(338nm)。

图11是实施例3五指毛桃色谱图(245nm)。

图12是实施例3五指毛桃色谱图(338nm)。

具体实施方式

实施例1

等度洗脱测定芹菜素和补骨脂素

实验材料