[发明专利]一种创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法

权利要求书

1.一种创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法，其特征在于包括以下步骤：

S1. 亲本选择与杂交组合配置：根据育种目标，选择含墨兰基因组的杂交兰为核心亲本配置杂交组合，获得果实；

S2. 单种子培养与中间繁殖体形态及增殖能力鉴定：对杂交后代种子进行无菌播种获得中间繁殖体，对单粒种子形成的中间繁殖体进行继代培养，观测中间繁殖体增殖能力和类型，选择增殖能力强且为根状茎类型的中间繁殖体；

S3. 植株再生与再生能力及试管苗形态鉴定：对中选的中间繁殖体进行植株再生，观测其再生成苗能力和试管苗形态，选择植株再生能力强且试管苗形态为墨兰型或似墨兰型的株系；

S4. 易工厂化繁殖墨兰资源的获得：对获得的株型为墨兰型或似墨兰型的试管苗进行移栽和栽培，即获得易工厂化繁殖墨兰资源；

步骤S1中按照母本为含墨兰基因组的杂交兰、父本为墨兰；或母本为墨兰、父本为含墨兰基因组的杂交兰；或父母本均为含墨兰基因组的杂交兰配置杂交组合；

步骤S2所述的单种子培养与中间繁殖体形态及增殖能力鉴定包括以下步骤：

S21. 果实消毒、接种和初代培养：将杂交后150～190天的果实洗净，然后用75%乙醇消毒7～10分钟，无菌水冲洗2～4次，取其内部种子接种到种子萌发培养基上培养；培养条件为温度26±1℃，暗培养；所述的种子萌发培养基配方为MS培养基 + 0.3～1.0mg/L 6-BA +0.1～0.5mg/L NAA + 10～20%椰子汁 + 20～40g/L蔗糖+0.3～0.5g/L活性炭+ 7～8g/L卡拉胶；

S22. 中间繁殖体的增殖：将种子萌发后形成的中间繁殖体分开，单独接种于增殖培养基上培养，形成中间繁殖体系；培养条件为温度26±1℃，每日光照8～12小时，光照强度500～1000lux；

S23. 中间繁殖体增殖能力和形态鉴定：对各中间繁殖体系的形态进行观察，选择形态为根状茎的中间繁殖体系；将根状茎掰成长度0.7～1.3cm的小段于增殖培养基上进行增殖培养，选择增殖60天后增殖系数大于2.0的中间繁殖体系；

步骤S22和S23中所述的增殖培养基配方为MS培养基 + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.1～0.5mg/L NAA + 0～20%椰子汁 + 20～40g/L蔗糖 + 0.3～0.5g/L活性炭+ 7～8g/L卡拉胶；

步骤S3中所述植株再生与再生能力及试管苗形态鉴定包括如下步骤：

S31. 分化培养：将增殖培养后根状茎直接或分开转接到分化培养基上培养，每瓶接8～15条或块；培养条件为温度26±1℃，每日光照10～12小时，光照强度1000～1200lux；所述的分化培养基配方为MS培养基 + 1.0～3.0mg/L 6-BA + 0.1～0.5mg/L NAA + 20～40g/L蔗糖 + 0.01～0.3g/L活性炭 + 7～8g/L卡拉胶；

S32. 生根壮苗培养：将株高3～5cm的芽或苗从根状茎上掰下，接种到生根壮苗培养基上培养，每瓶接8～10株；培养条件为温度26±1℃，每日光照10～12小时，光照强度1200～2000lux；

S33. 再生能力和试管苗形态鉴定：观测根状茎分化和生根壮苗过程，选择易分化成苗、出叶时间间隔长、芽苗生长速度快的株系；对获得的试管苗形态进行观察，选择试管苗形态为墨兰型或似墨兰型的株系，即株型紧凑、叶姿直立、叶横截面形状近V字形的株系；

步骤S32中所述的生根壮苗培养基配方为1/2MS培养基 + 0.1～0.2mg/L 6-BA + 0.5～2mg/L NAA + 20～40g/L蔗糖 + 0.3～0.5g/L活性炭+7～8g/L卡拉胶。

2.根据权利要求1所述的创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法，其特征在于：

步骤S4所述的易工厂化繁殖墨兰资源的获得包括以下步骤：

S41. 试管苗移栽：选择苗高大于或等于8cm，根系健壮的试管苗洗净晾干后进行移栽，移栽基质为6号树皮+泥炭的混合基质，移栽容器为6×6或8×8的黑色塑料杯，移栽后在4000～6000lux光照、80～95%相对湿度、20～30℃温度、通风良好下栽培7～10天，试管苗成活后转入常规管理；所述的6号树皮与泥炭的质量比为1～2：1；

S42. 易工厂化繁殖墨兰资源的获得：将生长10个月的小苗进行换盆，移栽基质为4号树皮+泥炭的混合基质，移栽容器为14×14或15×15的黑色塑料杯中，成活后转入常规管理；所述的4号树皮与泥炭的质量比为2～3：1。