[发明专利]一种透明质酸季铵盐的制备方法

说明书

本发明提供了一种透明质酸季铵盐的制备方法，步骤如下：将透明质酸金属盐在醇溶液中酸化，过滤后滤饼经过醇洗得酸性透明质酸；将酸性透明质酸溶解于水中，然后用季铵碱溶液调节pH至近中性，得透明质酸季铵盐溶液；将上述溶液冻干得透明质酸季铵盐干粉，其金属离子含量为0.1%‑1.0%。本发明的制备方法通过固体透明质酸进行离子交换来代替透明质酸为粘稠溶液的状态下进行离子交换；以醇溶液为介质代替离子交换树脂为介质进行离子交换；以简单固液分离代替离心机离心分离。本发明的工艺简单，占用设备少，生产成本低，离子置换效率高，收率高，适合工业化生产。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种透明质酸季铵盐的制备方法。

背景技术

透明质酸是由葡萄糖醛酸和氨基葡萄糖为双糖单位组成的直链高分子多糖，存在于皮肤、眼玻璃体、软骨、关节滑液等许多结缔组织中，并在其中起到保湿、营养、修复和预防损伤等生理作用，透明质酸一般为其钠盐，即透明质酸钠，溶于水，但不溶于有机溶剂，研究者为了得到改性透明质酸，一般会需要可溶于有机溶剂（如二甲基亚砜﹑二甲基甲酰胺）的透明质酸，一般是透明质酸的季铵盐，如透明质酸的四丁基铵盐（HA-TBA）。中国专利（公开号CN 104725529 A）和韩国专利（专利号KR 20100133688 A）其中报道了HA-TBA的制备方法。目前已经报道的HA-TBA的制备方法均是利用离子交换树脂将钠离子置换成四丁基铵根离子，但是该技术具有以下特点：该工艺中使用了离子交换树脂，由于透明质酸为大分子物质，溶于水后溶液会较粘稠，直接在离子交换层析柱内交换，透明质酸溶液很难流出，实际操作性差，消耗的时间也较长；另外如果通过将负载有四丁基铵根离子的离子交换树脂与透明质酸钠溶液混合搅拌进行离子交换，然后再分离，也需要混和、分离多次重复操作，才可以将透明质酸钠的钠离子几乎完全转化为铵根离子，另外，由于透明质酸溶液比较粘稠，靠简单的静置分层倾析方法将透明质酸溶液与离子交换树脂分离简直是不可能，所以必须通过离心或过滤等方式才能进行固液分离。所以该工艺复杂，比较费时、费力，用到的设备也较多，不适合工业化生产。

发明内容

针对目前离子交换制备透明质酸季铵盐工艺复杂、不适合工业化生产等问题，本发明提供一种工艺相对简单、所用设备相对较少、生产成本低、适合工业化生产的透明质酸季铵盐的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种透明质酸季铵盐的制备方法，采用以下步骤：

（1）将透明质酸金属盐在醇溶液中酸化，过滤后滤饼经过醇洗得酸性透明质酸；

（2）将步骤（1）中酸性透明质酸溶解于水中，然后用季铵碱溶液调节pH至近中性，得透明质酸季铵盐溶液；

（3）将步骤（2）中的溶液冻干得透明质酸季铵盐干粉。

可选地，透明质酸金属盐的分子量为5×10⁴-3×10⁶ Da。

可选地，透明质酸金属盐为透明质酸的碱金属盐、碱土金属盐或锌盐；优选为钠盐、钾盐或钙盐。

可选地，步骤（1）中醇溶液的浓度为50%-100%（v/v）。

可选地，步骤（1）中醇为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇，最优选为乙醇。

可选地，透明质酸金属盐与醇溶液的质量体积比为1.0%-15%；优选为3.0%-10%。

可选地，步骤（1）中的酸为盐酸、硫酸、硝酸或乙酸，最优选为盐酸；所述盐酸的浓度为12 mol/L。

可选地，步骤（1）中酸化过程的酸液与醇溶液的体积比为1:10-1:100，优选为1:50-80。

作为优选，步骤（1）中所得酸性透明质酸，其1wt%溶液的pH为2.0-3.0。