[发明专利]一种用于检测肺癌的试剂盒

说明书

本发明涉及一种用于检测肺癌的试剂盒，其包含特异性检测miRNA‑6070的试剂。本发明的试剂盒可以有效的检测大细胞肺癌，所述试剂盒可快速实现miRNA的定量检测，从而达到快速有效的检测大细胞肺癌的目的。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，更具体的涉及一种用于检测肺癌的试剂盒。

背景技术

肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明确。根据世界卫生组织(WHO)的病理学分析，肺癌分为四种主要组织类型：小细胞肺癌和非小细胞肺癌，后者还可再进一步分为肺腺癌、鳞状上皮细胞癌和大细胞癌。大细胞肺癌实际上是肺腺癌的一种变异，在组织学上它既没有鳞癌的特征，也没有腺癌或小细胞肺癌的特征，属于一种未分化型肺癌。大细胞肺癌发病率不高，占全部肺癌的2％～8％。大细胞肺癌常发生于肺上叶，多为周围型，体积较大，边界清楚，分叶，少见空洞。其恶性程度高，治疗效果差，预后不良。因此如果能够在发病早期及时的诊断出大细胞肺癌将大大提高患者的治疗效果，而现有的常规检测方法均无法有效的在早期检测出大细胞肺癌，因此迫切的需要提供一种早期诊断大细胞肺癌的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于检测肺癌的试剂盒，具体来说是一种检测大细胞肺癌的试剂盒。

本发明的一个技术方案是提供一种用于检测肺癌的试剂盒，其包含特异性检测miRNA-6070的试剂。

优选的，所述试剂包括反转录引物、正向引物、反向引物，所述反转录引物序列如SEQ ID NO：1所示，所述正向引物的序列如SEQ ID NO：2所示，所述反向引物的序列如SEQID NO：3所示。

本发明的另一个技术方案是提供SEQ ID NO：1-3在用于制备检测肺癌的试剂盒中的用途。

发明人在前期的细胞学试验中，通过差显表达的方法发现miRNA-6070的表达量与大细胞肺癌密切相关，miRNA-6070的高表达预示着大细胞肺癌的发生，为了进一步证实该结论，发明人又通过临床样本统计学实验进一步证实了该相关性。

本发明的试剂盒可以有效的检测大细胞肺癌，所述试剂盒可快速实现miRNA的定量检测，从而达到快速有效的检测大细胞肺癌的目的。

附图说明

图1引物的扩增曲线

图2临床标本中大细胞肺癌与正常对照组之间外周血miRNA-6070的表达水平比较图

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

实施例1

样本收集及伦理声明

收集60例大细胞肺癌和30例正常人群血液，所有标本均来自苏州大学第一附属医院和苏州大学第二附属医院，标本收集时间为2015年9月至2017年6月。上述标本的收集均通过苏州大学第一附属医院伦理审查委员会和苏州大学第二附属医院伦理审查委员会的批准，所有受试者均签署了知情同意书。

以上肺大细胞癌血清标本来源的病人均通过穿刺活检或者手术得到了细胞学或者病理学的病理诊断，病人在采血之前未经过任何放疗或化疗的治疗。

1.血清miRNA的提取

1)200μl血清中加入500μl TRIzol，涡旋振荡30s，室温静置5min。

2)加200μl三氯甲烷，剧烈颠倒混匀45s，室温静置5min。