[发明专利]一种金针菇的木屑保藏方法在审
申请号: | 201710884564.X | 申请日: | 2017-09-26 |
公开(公告)号: | CN107815415A | 公开(公告)日: | 2018-03-20 |
发明(设计)人: | 周庆林;陈建华 | 申请(专利权)人: | 广东香勤生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12R1/645 |
代理公司: | 东莞市华南专利商标事务所有限公司44215 | 代理人: | 姜华 |
地址: | 523000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金针菇 木屑 保藏 方法 | ||
技术领域
本发明涉及菌种的保藏技术领域,具体涉及一种金针菇的木屑保藏方法。
背景技术
对于食用菌工厂化周期生产来说,菌种工作必然是重中之重,菌种的纯度和质量决定着后期出菇的产量和质量,而一株优良的菌种如何保藏下来延长使用周期则是菌种工作中必不可缺的一项工作。目前金针菇的菌种保藏方法有斜面低温保藏法,麦粒保藏法,斜面生理盐水保藏法,石蜡封口斜面低温保藏法(此法是在斜面低温保藏法的基础上用石蜡封住试管口,待石蜡凝固即可)等;斜面低温保藏法和石蜡封口保藏法保藏周期不长,一般半年左右,时间长,培养基干固,菌丝变黄老化变异;麦粒保藏法制作工艺复杂,麦粒浸泡时间不好掌握,易产生粉孢子;斜面生理盐水保藏操作简单,但存放时间长了斜面易脱壁,斜面培养基漂浮出水面,造成露出部分干固,菌种老化,容易变异,活化时易产生粉孢子影响出菇产量和质量。
发明内容
为了克服现有技术中存在的缺点和不足,本发明的目的在于提供一种金针菇的木屑保藏方法,保藏时间长,不易产生孢子,同时能够避免因生长环境改变所引起的金针菇菌种基因性状改变而导致产量、质量的下降。
本发明的目的通过下述技术方案实现:一种金针菇的木屑保藏方法,包括以下步骤:
(1)配料:分别配置斜面培养基和木屑培养基;
(2)制备斜面菌种:将金针菇菌种接种到所述步骤(1)制备的斜面培养基进行斜面培养,得到斜面菌种;
(3)制备木屑菌种:将所述步骤(2)得到的斜面菌种接种到所述步骤(1)制备的木屑培养基进行培养,得到木屑菌种;
(4)保藏:将所述步骤(3)得到的木屑菌种在0-4℃温度下保藏。
本发明通过采用斜面培养,相对于平面培养,斜面为金针菇菌种的繁殖提供更大的繁殖面积,能有效地提高了金针菇菌种的培养效率和培养效果。
本发明金针菇菌种的保藏方法操作简单,成本低,可行性高,保藏金针菇菌种的时间长,且在保藏过程中,金针菇菌种不易产生粉孢子,保持原菌种优良基因稳定,不易变异退化,对于优良菌种的保藏有着重大的作用。
金针菇是木腐菌,本发明通过用木屑作为主料保藏金针菇菌种更能保持菌种的优良基因不突变,同时使金针菇菌丝球保持着菌种的生理活性和细胞形态,能够避免因生长环境改变所引起基因性状改变而导致产量质量下降。
优选的,所述步骤(1)中,每1.5升斜面培养基的原料包括:马铃薯100-300g、葡萄糖10-30g、琼脂10-30g、硫酸镁0.2-1g、磷酸氢二钾0.5-2g、豆粕3-10g、蛋白胨3-10g和酵母粉1-5g。
优选的,所述斜面培养基的制备方法包括如下步骤:取马铃薯100-300g加入1.5L的水煮熟,然后过滤,得到滤液,将滤液分别加入葡萄糖10-30g、琼脂10-30g、硫酸镁0.2-1g、磷酸氢二钾0.5-2g、豆粕3-10g、蛋白胨3-10g和酵母粉1-5g加热至溶解,并补水至1.5L,将得到的培养液在115-130℃温度下灭菌20-40min,待培养液冷却到50-70℃时摆成斜面,然后冷却至20-30℃,即得到斜面培养基。另一优选的,所述步骤(1)中,斜面培养基的制备方法包括如下步骤:取马铃薯200g加入1.5L的水煮熟,然后过滤,得到滤液,将滤液分别加入葡萄糖20g、琼脂20g、硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾1g、豆粕5g、蛋白胨5g和酵母粉2g加热至溶解,并补水至1.5L,将得到的培养液在124℃温度下灭菌30min,待装有培养液的试管冷却到60℃时摆成斜面,然后冷却至23℃后即得到斜面培养基。
本发明采用PDA培养基原料制备斜面菌种,能够使得金针菇菌种的能极大的培养效率和培养效果。
斜面培养基的制备方法具体操作过程为,按上述质量称取取马铃薯、葡糖糖、琼脂、硫酸镁、磷酸氢二钾、豆粕5g、蛋白胨和酵母粉,先将马铃薯切成小方块,加入1.5L的水煮熟而保持不烂,然后用纱布过滤,虑后的滤液与称好的其它原料一起煮,至全部药品溶解,混合均匀为准,最后分装到每一支试管内塞好棉花塞,每支试管分装约10ML;将分装好的试管分每7支一扎放在高压蒸汽灭菌锅中在115-130℃,灭菌20-40min,灭菌结束后,待高压炉中的试管冷却到60摄氏度左右时将试管摆成斜面,尽量让斜面占试管的2/3,摆好后用毛巾盖好,待冷却后使用,即得到斜面培养基。
优选的,所述步骤(1)中,所述木屑培养基包括以下原料:每100mL水中加入木屑200-240g、麸皮35-50g和米糠20-40g。
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