[发明专利]提高thaxtomin发酵产量的方法有效
| 申请号： | 201710886608.2 | 申请日： | 2017-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN109554415B | 公开（公告）日： | 2022-04-29 |
| 发明（设计）人： | 娄春波;赵学金 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12P17/16 | 分类号： | C12P17/16;C12N1/21;C12R1/465;C12R1/47;C12R1/61 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 朱学珺;董世豪 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提高 thaxtomin 发酵 产量 方法 | ||
1.一种生产thaxtomin的方法，所述方法包括在异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE，以及对所述异源链霉菌进行发酵；其中，所述异源链霉菌选自于如下的任一种链霉菌：天蓝色链霉菌以及白色链霉菌；
所述thaxtomin选自于由如下化合物所组成的组中的一种：thaxtomin A、thaxtomin B以及thaxtomin D。
2.如权利要求1所述的方法，其中，将酸性疮痂链霉菌的thaxtomin基因簇整体转化入所述异源链霉菌，实现在所述异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述thaxtomin基因簇包含酸性疮痂链霉菌染色体的132205bp-156019bp的序列。
4.如权利要求1所述的方法，其中，将编码TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的各片段转化入所述异源链霉菌，实现在所述异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE。
5.如权利要求1所述的方法，其中，所述在异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步骤进一步包括：在txtAB和txtED操纵子的上游添加链霉菌组成型启动子，其中，txtA和txtB合称为txtAB，txtD和txtE合称为txtED。
6.如权利要求1所述的方法，其中，所述在异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步骤进一步包括：在txtAB、txtED和txtC操纵子的上游添加链霉菌组成型启动子，其中，txtA和txtB合称为txtAB，txtD和txtE合称为txtED。
7.如权利要求1所述的方法，其中，所述在异源链霉菌中表达酸性疮痂链霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步骤进一步包括：在所述酸性疮痂链霉菌的txtA、txtB、txtC、txtD以及txtE的CDS的上游添加链霉菌组成型启动子。
8.如权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，在txtA的CDS上游第1bp-1000bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
9.如权利要求8所述的方法，其中，在txtA的CDS上游第30-100bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
10.如权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，在txtE的CDS上游第1bp-1000bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
11.如权利要求10所述的方法，其中，在txtE的CDS上游第30-100bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
12.如权利要求6或7所述的方法，其中，在txtC的CDS上游第1bp-1000bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
13.如权利要求12所述的方法，其中，在txtC的CDS上游第30-100bp处的任一位置添加链霉菌组成型启动子。
14.如权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，所述链霉菌组成型启动子选自于由如下启动子所组成的组：ermEp系列启动子、SF14P启动子、kasOP系列启动子。
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