[发明专利]一种可视化快速检测有机汞化合物的方法

说明书

本发明属于水环境和水产品中有机汞的检测技术领域，具体涉及一种可视化快速检测有机汞化合物的方法。先将HT9 DNA适配体序列分别与硝酸银和不同浓度的有机汞标准溶液充分混匀后；接着分别依次加入Tris‑HNO₃缓冲液、NaBH₄溶液和HAuCl₄溶液，于95℃下恒温10分钟，利用数码相机记录溶液的颜色变化，与有机汞溶液的浓度对应，建立标准色卡；然后将待测试液按照前述步骤进行操作，利用数码相机记录溶液的颜色或裸眼观察溶液颜色，与标准色卡进行比对，实现水样或水产品提取液中有机汞的半定量检测。该方法操作简单，检测速度快，检测整个过程在2小时之内完成；检测成本低，一个样品检测成本低于2元。

技术领域

本发明属于水环境和水产品中有机汞的检测技术领域，具体涉及一种可视化快速检测有机汞化合物的方法。

背景技术

汞（Hg）是常温下唯一的液态金属，具有强毒性，汞中毒会对人体产生不可逆的伤害。排放到环境中的无机汞（Hg2+）很容易发生生物反应、产生形态变化，形成有机汞，比如甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）。所以，环境中同时存在多种不同形态汞化合物包括无机汞（Hg²⁺）、甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）。环境中汞的存在形态不同，其生物利用率、迁移性和毒性大不相同。通常，有机汞的含毒性大大高于无机汞，特别是甲基汞，其毒性是无机汞的几百倍。而且，由于有机汞具有明显的亲脂性，很容易在生物体内积累形成生物积累效应和生物放大效应。所以，生物体内的有机汞的含量通常比周边环境高出许多。比如，海产品中汞的含量可比海水高出上万倍，且大部分为甲基汞（MeHg）。著名的“水俣病”就是由于食用受有机汞污染海产品所引起的。所以，对水环境和水产品中的有机汞，比如甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）进行分析测定，对于食品安全和人体健康具有重要意义。我国目前也已经要求对水产品中的甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）进行测定。

目前, 不同形态汞化合物，比如无机汞（Hg²⁺）、甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）的分析检测主要采用联用技术，包括气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)或毛细管电泳( CE )和原子荧光光谱(AFS)、原子吸收光谱(AAS)、原子发射光谱(AES)或电感耦合等离子体质谱( ICP-MS)联用技术。这些联用技术灵敏度高、准确度好，可用于水环境和水产品中甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）的分析测定。但是，上述联用技术都存在着致命缺点，比如需要昂贵的大型仪器和熟练的操作人员、分析成本高、时间长、操作繁琐等，无法用于水环境和水产品中甲基汞（MeHg）和乙基汞（EtHg）的快速、低成本检测。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种可视化快速检测甲基汞和乙基汞化合物的方法。该检测方法具有选择性好、低成本、可视化、简单快速等优点，克服了传统有机汞化合物检测方法仪器昂贵、前处理操作复杂、检测时间长等缺点。

为实现本发明的目的，采用如下技术方案：

一种可视化快速检测有机汞化合物的方法，包括以下步骤：

1）比对标准的建立：将20μL、75μM HT9 DNA适配体序列与10μL、0.2mM硝酸银分别和10μl不同浓度的有机汞标准溶液充分混匀后，在0℃放置1小时，配制成一系列溶液；接着在上述一系列溶液中分别加入150μL、10mM 、pH=8.0的Tris-HNO₃缓冲液，混匀后降温至0℃，再分别加入5μL、25mM的NaBH₄溶液，混匀离心10秒后，在25 ℃下恒温放置8分钟；然后分别加入5μL2wt% HAuCl₄溶液，混匀离心10秒后，在95 ℃下恒温10分钟，利用数码相机记录溶液的颜色变化，与有机汞溶液的浓度对应，建立标准色卡；并用紫外分光光度计测定溶液的吸光度，与有机汞溶液的浓度对应，建立吸光度—有机汞溶液浓度标准曲线；