[发明专利]从川楝树中提取川楝素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物有效成分提取技术领域，具体涉及一种从川楝树中提取川楝素的方法。

背景技术

川楝（Melia toosendan Sieb. et Zucc. ），为楝属植物川楝亚种，落叶乔木，高可达10米。川楝素是从楝属植物的根皮、枝皮和果实中提取出的四环三萜类化合物。川楝素具有驱虫、杀虫等功效，同时具有非常好的抗肉瘤效应，能够诱导细胞分化、凋亡并抑制人和动物的多种肿瘤细胞繁殖。目前，川楝素的提取方法主要由浸提法、索氏提取法、超声波提取法、微波辅助提取法和超临界二氧化碳萃取法等。

中国专利2013106181608公开了一种从川楝皮中提取川楝素的方法，采用萃取和重结晶的方法获得。该方法简单，但是提取消耗的时间长，效率低，不能适用工业化生产的需要。中国专利201310423688X公开了一种从苦楝皮中提取川楝素的方法，是将干燥成熟的苦楝皮洗干净后用粉碎机打碎，磨成粉末，烘干，加入60% 的乙醇溶剂；调节溶液pH 值4~6，加入纤维素酶酶解；将所述提取液置于双频超声提取器中，得到酶解液；将酶解液高温灭活，得到提取液，离心，取上清液；氯仿萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，加入乙醇，加热溶解，滴入石油醚直到混合物变成混浊物，静置，析出淡黄色固体，即为川楝素。该方法通过酶解和双频超声波提取，虽然能提高川楝素的含量，但是分离纯化的效果不足，得到的川楝素纯度低。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种从川楝树中提取川楝素的方法。本发明通过复合酶预处理、高压脉冲电场提取、澄清剂澄清、活性炭脱色、大孔吸附树脂吸附、石油醚沉淀等步骤对川楝素进行提取，能够有效提高川楝素的纯度和提取率，提取得到的川楝素得率高，杂质少，纯度高。

本发明通过以下技术方案实现：

从川楝树中提取川楝素的方法，包括以下步骤：

（1）：将川楝树的根皮和树皮洗净，晾干，粉碎；

（2）：用水将步骤（1）粉碎后的物料浸没，加入物料重量0.01-0.05%的复合酶，酶解1-3h，得酶解液；

（3）：将步骤（2）的酶解液与无水乙醇按料液比1:15-20混合，放入高压脉冲电场中提取6-12min，得粗提液；

（4）：向步骤（3）的粗提液中加入天然中药澄清剂KBT-ZTC，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.1-0.3g/L活性炭进行脱色10-20min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；

（5）：将步骤（4）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；

（6）：将步骤（5）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；

（7）：将步骤（6）的川楝素粗品用3-6倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，回收乙醇，得川楝素纯品。

作为本发明的进一步说明，步骤（1）所述川楝树的根皮和树皮粉碎至60-100目。

作为本发明的进一步说明，步骤（2）所述复合酶为纤维素酶、半纤维素没和果胶酶以任意比例混合。

作为本发明的进一步说明，步骤（3）所述高压脉冲电场的电场强度为25-40kV/cm，脉冲数为6-10个。

作为本发明的进一步说明，步骤（4）所述天然中药澄清剂KBT-ZTC为科立尔生物科技有限公司生产的澄清剂，加入量为2-5g/L。

作为本发明的进一步说明，步骤（5）所述甲醛为60-100%甲醛。

与现有技术相比，本发明的优点及有益效果为：

1、本发明将川楝树粉碎后的物料，用复合酶进行处理，使物料细胞壁被破坏，再结合高压脉冲电场提取，脉冲电场产生的磁场与脉冲电场交替作用，使物料的细胞膜透性增加，振荡加剧，最终使细胞膜内物质流出。本发明通过酶解技术和高压脉冲电场技术，能够使川楝素溶出率达到最大，有效提高川楝素的提取率，而且提取时间较常规提取时间大大缩短。

2、本发明引入天然中药澄清剂KBT-ZTC，对在乙醇提取的过程中存在的蛋白质、油脂、淀粉等大分子杂质，起到良好的澄清作用；提取液经过活性炭脱色，去除了色素，为后续分离纯化提供良好的基础。

3、本发明利用大孔树脂对川楝素进行分离提纯，将川楝素从粗提液中分离，减少川楝素中杂质的含量。