[发明专利]AHU377及其异构体的色谱分析方法

说明书

本发明提供了一种AHU377及其异构体的色谱分析方法，该方法采用高效液相色谱，以键合型手性色谱柱为色谱柱，三氟乙酸与另外两种有机溶剂以一定配比组成三元流动相，流动相的流速为0.7‑1.0mL/min。该方法可以简单、准确的在一个条件下将AHU377及其三个异构体进行有效的分离。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种AHU377及其异构体的色谱分析方法。

背景技术

AHU377，即4-(((2R,4S)-1-([1,1’-联苯]-4-基)-5-乙氧基-4-甲基-5-氧代戊烷-2-基)氨基)-4-氧代丁酸，可与血管紧张素IIAT1受体拮抗剂缬沙坦以1:1的摩尔比组成LCZ696，LCZ696属于血管紧张素II(AT2)受体和脑啡肽酶(Neprilysin)受体双重抑制剂，其降压效果要优于标准降压药物，是一种新型治疗心力衰竭的药物。

AHU377的结构式如下：

AHU377有两个手性中心，即有三个异构体，分别为：AHU377-A(构型为RS)、AHU377-B(构型为RR)和AHU377-C(构型为SS)。

目前，尚无国家标准、各国药典及文献收载AHU377及其异构体的色谱分析方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种AHU377及其异构体的色谱分析方法，该方法在一个色谱条件下即可将AHU377及其异构体进行分离，简便、有效。

AHU377及其异构体的色谱分析方法，采用如下条件进行分离分析：

1)色谱条件：

色谱柱：键合型手性色谱柱；

流动相：有机溶剂A、有机溶剂B、三氟乙酸组成的三元流动相，有机溶剂A、有机溶剂B、三氟乙酸的体积比为90-92：8-10：0.1-0.2，所述有机溶剂A为正己烷、正庚烷或其组合，所述有机溶剂B为异丙醇、无水乙醇或其组合；

流动相的流速：0.7-1.0mL/min；

柱温：30-45℃；

检测波长：254nm；

检测时间：70-90min；

2)样品溶液的配制：取待测样品采用色谱条件中所述的流动相溶解并稀释，配制成样品溶液；

3)分离分析：取步骤2)的样品溶液5-20μL注入液相色谱仪，完成AHU377及其异构体的分离与分析。

优选地，所述键合型手性色谱柱为IC手性色谱柱。

优选地，所述IC手性色谱柱的规格为3.5μm，4.6×250mm。

优选地，所述流动相为正己烷、异丙醇、三氟乙酸组成的三元流动相，正己烷、异丙醇、三氟乙酸的体积比为90：10：0.1。

优选地，所述流动相的流速为0.8mL/min。

本发明通过多次实验尝试，通过筛选不同填料的手性色谱柱、流动相组成以及比例、柱温、流速等检测条件，确定了一种可有效分离AHU377及其异构体的检测方法。