[发明专利]一种α核苷合成方法

说明书

本发明公开了一种α核苷合成方法。所述方法包括步骤：(1)使结构如式Ⅳ所示的5‑O‑叔丁基二甲基硅烷‑2,3‑O‑异亚丙基‑D‑呋喃核糖上的羟基氯化得到含有结构如式Ⅱ所示化合物的反应液；(2)将含有结构如式Ⅱ所示化合物的反应液与碱基进行偶联得到结构如式Ⅲ所示的化合物；和(3)使结构如式Ⅲ所示的化合物脱保护得到结构如式Ⅰ所示的α核苷。

技术领域

本发明属于核苷化合物合成技术领域，更具体地，本发明涉及一种α核苷合成新方法。

背景技术

反义技术(Antisense Technology)是根据碱基互补原理，用人工合成或生物体合成的特定DNA或RNA片段抑制或封闭基因表达的技术，是一种新的药物开发方法。1990年,Debart等首次报道了寡聚α-尿嘧啶核苷酸的合成，并证实它能阻止多种蛋白酶的非专一性降解(Debart F,Rayner B,Imbach JL.Tetrahedron Lett.,1990,Vol.31,No.25,3537-3540)。构建α构型的寡核苷酸的重要单体为α核苷(王升启,马立人。军事医学科学院院刊,1991；15∶191)。

对于α核苷的合成，文献中报道了两种方法。其中一种方法(Nucleic AcidsResearch,1992,Vol.20,No.6,1193-1200)，以酰基保护型的糖E为原料，通过Silyl-Hilbert-Johnson反应条件与四大不同的(或保护的)碱基偶联得到化合物F，化合物F脱保护后得到产物α核苷。此方法较经典，但在糖与碱基的偶联反应中，反应的选择性不好，大多情况下构型的产物为主要产物，从而导致目标α构型的偶联产物收率较低；在该反应选择性不好的情况下，进而导致分离纯化(柱层析或结晶方式)此α构型的差向异构体往往非常不容易。该工艺路线简述如下：

文献中报道的另一种α核苷的合成方法为(J.Org.Chem.,1973,Vol.58,No.5,593-698)：该方法通过D-核糖与氨基氰一步反应得到关键中间体氨基噁唑糖化合物G，化合物G通过两步转化得到关键前体化合物F，F经水解得到产物α胞苷；化合物G与丙烯酸甲酯环合得到关键前体化合物G，G经水解得到产物α尿苷。该方法能够得到选择性非常好的α胞苷和α尿苷，但不适用于α构型的腺苷和鸟苷的合成，因而通用性不强。该工艺路线简述如下：

因此，设计一种选择性好，通用性强，工艺纯化方法简单的α核苷合成新方法，将对于α构型的寡核苷酸药物的研究和制备具有非常积极的意义。

发明内容

本发明旨在提供一种α核苷的制备方法。

本发明提供了一种结构如式I所示的α核苷的制备方法，所述方法包括步骤：

(1)使结构如式Ⅳ所示的5-O-叔丁基二甲基硅烷-2,3-O-异亚丙基-D-呋喃核糖上的羟基氯化得到含有结构如式Ⅱ所示化合物的反应液；

(2)将含有结构如式Ⅱ所示化合物的反应液与碱基进行偶联得到结构如式Ⅲ所示的化合物；和

(3)使结构如式Ⅲ所示的化合物脱保护得到结构如式Ⅰ所示的α核苷；

其中，B表示腺嘌呤或其衍生物、鸟嘌呤或其衍生物、胞嘧啶或其衍生物、尿嘧啶或其衍生物、胸腺嘧啶或其衍生物。

在另一优选例中，步骤(1)的反应溶剂为四氢呋喃，氯化试剂为四氯化碳，反应的促进剂为三(二甲胺基)膦。

在另一优选例中，步骤(1)中四氯化碳和三(二甲胺基)膦与原料5-O-叔丁基二甲基硅烷-2,3-O-异亚丙基-D-呋喃核糖的摩尔比均为1.2-1.5。

在另一优选例中，步骤(1)的反应温度为-78--50℃，反应时间2-3小时。