[发明专利]从动物硬质骨中采用酸‑酶结合提取I型胶原蛋白的方法

权利要求书

1.一种从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、对骨原料进行前处理，之后用盐酸进行脱钙处理，所述盐酸浓度0.01～0.02mol/L，浸泡时间为10～12h，浸泡过程中搅拌转速为12～24rpm；脱钙处理之后清洗至pH 3～5；

步骤二、对所述步骤一所得的物料进行加热蒸煮，蒸煮温度90～95℃，2～3h；

步骤三、将所述步骤二所得的物料冷却，加入蛋白酶酶解，所述蛋白酶为胃蛋白酶，添加量为所述骨原料的3～5‰，酶解温度为50～55℃，酶解时间5～7h，保持在pH5～7；

步骤四、从所述步骤三所得的物料分离得到酶解液；

步骤五、对所述步骤四得到的酶解液进行后处理，得到骨I型胶原蛋白粉。

2.如权利要求1所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤一中，对骨原料进行前处理，其具体包括：将骨原料去脂，其中，所述去脂采用氢氧化钠溶液，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.5～0.8mol/L，浸泡时间为6～7h，浸泡过程中搅拌转速为12～24rpm。

3.如权利要求1所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤四中，从所述步骤三所得的物料分离得到酶解液，其具体过程包括：对所述步骤三得到的物料进行三相分离，分离过程分为两步，先进行固液分离，将分离得到的固相无机物残渣去除后再进行酶解液和骨油分离。

4.如权利要求1所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤五中，对所述步骤四得到的酶解液进行后处理，其具体包括以下步骤：对所述步骤四得到的酶解液进行灭酶灭菌处理，脱色脱盐处理，浓缩处理，浓缩后灭菌处理以及喷雾干燥处理。

5.如权利要求4所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述灭酶灭菌处理的温度为125～130℃，10～15s；所述脱色脱盐处理的具体过程包括：通过活性炭柱脱色，经过灭酶灭菌处理的酶解液的流速为4～6倍外水体积，再通过阴阳离子树脂柱进行脱盐处理，灭酶灭菌处理的酶解液的流速为6～8倍外水体积。

6.如权利要求4所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述浓缩处理的具体过程包括：对经过脱色脱盐处理的酶解液通过纳滤膜浓缩至浓度Brix10～15°，再通过双效降膜浓缩至浓度Brix40～45°。

7.如权利要求4所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述浓缩后灭菌处理的具体过程包括：将浓缩液送入保温储存罐巴氏灭菌90～95℃，10～15min。

8.如权利要求4所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述喷雾干燥处理的具体过程包括：浓缩后灭菌处理的料液送入喷雾塔，进风温度180～185℃，排风温度80～90℃，干燥至成品水分不大于5.0％。

9.如权利要求1所述的从动物硬质骨中采用酸-酶结合提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤三中，在酶解过程中，所述蛋白酶分两次加入，第一次加入蛋白酶，添加量为所述步骤二所得物料质量的0.2～0.5‰，酶解温度为50～55℃，保持在pH5～7，酶解时间为20～40min；之后再第二次加入蛋白酶，酶解温度为50～55℃，保持在pH5～7，两次加入蛋白酶的添加量合计为所述步骤二所得物料质量的3～5‰，两次酶解时间合计为5～7h。