[发明专利]一种糖基转移酶及其克隆表达方法与应用有效
申请号: | 201710906561.1 | 申请日: | 2017-09-29 |
公开(公告)号: | CN107746835B | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 江仁望;文超;黄伟;朱雪林;朱自荣 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12P33/20 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 陈燕娴 |
地址: | 510632 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖基转移酶 及其 克隆 表达 方法 应用 | ||
1.一种糖基转移酶,其特征在于:
所述的糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的糖基转移酶,其特征在于,编码所述的糖基转移酶的核苷酸序列选自如下(1)、(2)或(3):
(1)如SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列;
(2)与SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列不同,但是编码如SEQ ID NO. 1所示的氨基酸序列的核苷酸序列;
(3)与(1)或(2)任一项所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。
3.一种重组表达载体,其特征在于:
含有权利要求2所述的编码所述的糖基转移酶的核苷酸序列的重组表达载体。
4.一种基因工程化的宿主细胞,其特征在于:
所述的基因工程化的宿主细胞转化了如权利要求3所述的重组表达载体或者基因组上整合了如权利要求2所述的核苷酸序列的宿主细胞及其后代细胞;当所述宿主细胞属于植物细胞时,该植物细胞不属于可以借助光合作用,以水、二氧化碳和无机盐等无机物合成碳水化物、蛋白质来维系生存,并通常不发生移动的生物,即不属于植物品种。
5.权利要求1或2所述的糖基转移酶的克隆表达方法,其特征在于,包括如下步骤:
将编码所述的糖基转移酶的核苷酸序列克隆入表达载体中构建重组表达载体;再将所述的重组表达载体转入表达系统中进行异源表达;最后经纯化得到所述的糖基转移酶。
6.权利要求3所述的重组表达载体或权利要求4所述的基因工程化的宿主细胞在表达所述的糖基转移酶中的应用。
7.权利要求1或2所述的糖基转移酶的应用,其特征在于:
所述的糖基转移酶在制备糖基化修饰的化合物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:
所述的化合物为强心甾类化合物。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述的强心甾类化合物为洋地黄毒苷元、酯蟾毒配基、华蟾蜍它灵、沙蟾毒精、蟾毒灵、3α-蟾毒灵。
10.根据权利要求7~9任一项所述的应用,其特征在于:
所述的糖基化修饰为对强心甾类化合物C3位羟基进行糖基化修饰。
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