[发明专利]一种造血干细胞培养基

说明书

本发明公开了一种造血干细胞培养基，包括基础培养基和添加剂，按终浓度计，添加剂包括以下含量的组分：海藻糖60‑80ng/mL、维生素C 50‑65ng/mL、小蘖碱1‑3mg/mL、千金藤碱30‑50μmol/mL、第一细胞因子缓释球体1.2‑2.5mg/mL、第二细胞因子缓释球体15‑30mg/mL、氯化钠3‑8mg/mL、谷胱甘肽20‑30mg/mL、透明质酸5‑10μg/mL、葡萄籽提取物2‑5mg/mL、人参皂苷6‑12mg/mL和银耳多糖5‑10mg/mL。本发明中的各组分搭配合理，特定的组分之间相互配合，可以抗病原微生物，提高造血干细胞存活率、增殖速度和活性。

技术领域

本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种造血干细胞培养基。

背景技术

造血干细胞是血液系统中的成体干细胞，是一个异质性的群体，具体长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞，对研究各类干细胞，包括肿瘤干细胞，具有重要指导意义。由于造血干细胞具有多向分化的潜能，将造血干细胞移植到体内是治疗白血病、淋巴瘤等恶性肿瘤、代谢性疾病、自身免疫性疾病及先天免疫缺陷等严重危害人类健康疾病的有效方法，可以有效的减轻患者的痛苦。但是，由于造血干细胞在体内的数量极少，大大的限制了造血干细胞在临床中的应用。

骨髓、外周血和脐带血是造血干细胞的重要来源。与骨髓和外周血造血干细胞相比，脐带血造血干细胞更为原始，自我增殖能力最强，且脐带血具有富含更早期的造血干细胞、采集方便，造血半细胞免疫原性弱，对异源性抗原产生的抗体少，移植过程中不需要严格配型，成熟性T细胞较少，采集和保存容易，无肿瘤细胞污染，对供者无损伤和副作用等优点，因而，脐带血造血干细胞具有极大的临床应用价值。但是，单份脐血的造血干细胞含量低，在临床中很难用于正常体重成人患者的移植。因此，造血干细胞在移植前需要进行体外扩增。

目前，造血干细胞的体位增殖途径主要有两种，一种是通过基质的灌注进行体外培养，但是，基质含有各种细胞和各种蛋白成分，成分复杂且不明确，对后期造血干细胞的分离造成较大难度，且成本较高，大大限制了在造血干细胞体外增殖的中的应用；第二种是将造血干细胞接种于造血干细胞培养基进行体外培养。然而，采用现有造血干细胞培养基多数会采用胎牛血清，培养基中加入了非人源物质，对造血干细胞的培养会造成干扰，同时采用现有的培养基培养的造血干细胞大多存在活性和增殖能力较差的问题。现急需研究一种能够提高造血干细胞的扩增率和细胞活性培养基。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一种造血干细胞培养基，可有效解决现有的造血干细胞培养基培养造血干细胞时存在活性和增殖能力较差的问题。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种造血干细胞培养基，包括基础培养基和添加剂，按终浓度计，添加剂包括以下含量的组分：海藻糖60-80ng/mL、维生素C 50-65ng/mL、小蘖碱1-3mg/mL、千金藤碱30-50μmol/mL、第一细胞因子缓释球体1.2-2.5mg/mL、第二细胞因子缓释球体15-30mg/mL、氯化钠3-8mg/mL、谷胱甘肽20-30mg/mL、透明质酸5-10μg/mL、葡萄籽提取物2-5mg/mL、人参皂苷6-12mg/mL和银耳多糖5-10mg/mL。

进一步地，一种造血干细胞培养基，包括基础培养基和添加剂，按终浓度计，添加剂包括以下含量的组分：海藻糖70ng/mL、维生素C 55ng/mL、小蘖碱2mg/mL、千金藤碱38μmol/mL、第一细胞因子缓释球体2.0mg/mL、第二细胞因子缓释球体22mg/mL、氯化钠4mg/mL、谷胱甘肽25mg/mL、透明质酸6μg/mL、葡萄籽提取物3mg/mL、人参皂苷7mg/mL和银耳多糖6mg/mL。

进一步地，基础培养基为DMEM培养基。

进一步地，第一细胞因子缓释球体通过以下方法制备得到：