[发明专利]一种新金分枝杆菌及其在制备9-羟基黄体酮中的应用

权利要求书

1.一种新金分枝杆菌（Mycobacterium neoaurum），该新金分枝杆菌的保藏编号为CGMCC No.13901。

2.根据权利要求1所述的新金分枝杆菌在制备9-羟基黄体酮中的用途。

3.一种9-羟基黄体酮的制备方法，其特征在于，所述方法包括使用如权利要求1所述的新金分枝杆菌将黄体酮转化为9-羟基黄体酮。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1）将如权利要求1所述的新金分枝杆菌接种于种子培养基进行培养，得到种子培养物；其中，所述种子培养的培养基为BPYG培养基；所述BPYG培养基包括以下组分：

牛肉膏0.3g/L，蛋白胨1.0g/L，酵母粉0.3g/L，甘油1.5g/L，调节pH至7.0；

2）在发酵罐中，在黄体酮的存在下，将步骤1）的种子培养物接种于转化培养基发酵培养；

3）将步骤2）发酵培养后的发酵液离心，取沉淀溶于甲醇中，离心取上清液，将上清液蒸馏结晶，并将结晶置于水中，降温析晶，抽滤后减压干燥，既得。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述种子培养为振荡培养。

6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述培养为在28-32℃下，以200-250转/分振荡培养36-60 h。

7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述培养为在32℃下，以200-250转/分振荡培养48 h。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述转化培养基包括以下组分：

大豆蛋白胨1~5 g/L，酵母提取物0.5~2 g/L，葡萄糖0.5~2 g/L，柠檬酸0.1~0.3g/L，柠檬酸铁铵0.01~0.05g/L，K₂HPO₄ 0.5~1.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.01~0.1g/L，NH₄NO₃ 0.1~0.5g/L，黄体酮0.1~1.5g/L；调节pH至6.5-7.5。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述转化培养基包括以下组分：

大豆蛋白胨3 g/L，酵母提取物1 g/L，葡萄糖1.0g/L，柠檬酸0.2g/L，柠檬酸铁铵0.01g/L，K₂HPO₄ 1.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.05g/L，NH₄NO₃ 0.3g/L，黄体酮1.5g/L；调节pH至7.0。

10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述发酵培养中，种子培养物的体积比例为3-10%。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述发酵培养中，种子培养物的体积比例为4-6%。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述发酵培养中，种子培养物的体积比例为5%。

13.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵培养为摇瓶振荡培养或发酵罐深层培养。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述摇瓶振荡培养为在28-32℃下，以200-250转/分摇瓶振荡培养5-10天。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述摇瓶振荡培养为在32℃下。