[发明专利]一种N‑端脑利钠肽前体检测试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，更具体涉及一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其应用。

背景技术

心血管疾病是目前危害人类健康的重要疾病之一，中国每年因该疾病入院病人在三千多万，死于该疾病的有三百多万人，而且每年呈上升趋势。所以，利用合适的医疗设备对心血管疾病的诊断、治疗和康复已成为一个引起全球性重视的话题。N-端脑利钠肽前体(NT-ProBNP)是B型利钠肽激素原分裂后无活性的N端碎片，是典型的心脏标志物，主要在心肌细胞所受容量负荷增高时由左心室分泌。N-端脑利钠肽前体的应用在于协助诊断充血性心力衰竭，判断病情的严重程度和预后，以及指导治疗已经取得了医学界的广泛关注。

迄今，已有多篇相关的研究论文发表于新英格兰医学杂志、循环医学、美国心脏病学院杂志等权威杂志上。这些论文探讨了诸如NT-ProBNP在心衰急诊诊断中的作用、快速NT-ProBNP检测用于区别充血性心衰或肺部疾患导致的呼吸困难的病人等问题，为心衰的诊断和评估开辟了一个崭新的领域。

目前市面上检测NT-ProBNP的试剂盒主要是以荧光免疫分析法、酶联免疫分析法的方式进行检测，这些方法成本高、准确度低。还需要配备特定的仪器进行配合检测，操作比较繁琐。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供了一种成本低、特异性强、灵敏度高、准确度高、稳定性好、可定量检测血清中N-端脑利钠肽前体的含量的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其应用。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：

一方面提供一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，包含体积比为4:1的试剂R1和试剂R2；

其中，所述试剂R1的组分及含量为：

所述试剂R2的组分及含量为：

优选地，所述缓冲液选自HEPES缓冲液或硼酸缓冲液。

优选地，所述防腐剂选自HY-500防腐剂或叠氮钠。

优选地，所述表面活性剂选自S9或曲拉通-100。

优选地，所述胶乳微球的粒径为80nm。

另一方面，提供上述N-端脑利钠肽前体检测试剂盒在检测样本中N-端脑利钠肽前体的含量中的应用。

优选地，所述应用通过以下步骤实现：

1)向比色杯中加入样本和试剂R1，混匀，37℃孵育1分钟，置入全自动生化分析仪中，读取吸光度A1；

2)再向比色杯中添加试剂R2，混匀，37℃孵育5分钟，置入全自动生化分析仪中，读取吸光度A2；

3)根据校准曲线计算出样本中N-端脑利钠肽前体抗原的含量。

优选地，按体积比计，样本：试剂R1：试剂R2＝1:80:40，且样本、试剂R1和试剂R2的总体积至少为比色杯总体积的2/3。

检测原理是在胶乳微球上包被N-端脑利钠肽前体多克隆抗体，N-端脑利钠肽前体多克隆抗体和样本中的N-端脑利钠肽前体抗原发生凝集反应，形成了抗原抗体复合物并产生浊度，该浊度的高低与样本中的N-端脑利钠肽前体抗原浓度成正相关，测定其吸光度值并根据校准曲线计算出N-端脑利钠肽前体抗原的含量。

应用本发明试剂盒，可以在日立系列、贝克曼系列、奥林巴斯系列、东芝系列、西门子系列、雅培系列、罗氏系列、希森美康系列、迈瑞系列、迪瑞系列全自动生化分析仪上进行使用。

本发明相比现有技术具有以下优点：

该试剂盒成本低、特异性强、灵敏度高、准确度高、稳定性好，可定量检测血清中N-端脑利钠肽前体的含量；以一株高特异性，高敏感性NT-proBNP单克隆抗体为标记抗体，另一株单克隆抗体为捕获抗体，结合链亲和素-生物素放大系统，应用免疫金标层析技术，检测人血中NT-proBNP的含量。并且具有较高的检测灵敏度，操作简单、快速，从检测到出结果最多只需要5分钟，甚至更短。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

所有原料均为市购原料；所有配比中，对于固体，％表示g/100mL，对于液体，％表示mL/100mL。

实施例1

一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，包含体积比为4:1的试剂R1和试剂R2。

其中，试剂R1的组分及含量为：

试剂R2的组分及含量为：