[发明专利]环状RNA circ-PTGR1的用途

说明书

本发明提供了环状RNA circ‑PTGR1的用途，本发明首先证实了环状RNA circ‑PTGR1的客观存在；通过检测肝癌病人血清外泌体中环状RNA circ‑PTGR1表达情况，发现其表达水平上调；收集肝癌细胞系LM3分泌的外泌体与对照组PBS分别加至肝癌细胞系97L和HepG2中，其细胞迁移、细胞侵袭能力均显著升高；干扰circPTGR1能拮抗LM3外泌体对低转移细胞迁移、侵袭能力的促进作用。环状RNA circ‑PTGR1基因及其表达产物作为诊断肝癌的标志物，使肝癌诊断更加准确、快速，作为制备治疗肝癌药物的靶基因为治疗肝癌提供了新的治疗靶点和治疗途径。

技术领域

本发明涉及一种环状RNA，具体涉及环状RNA circ-PTGR1的用途。

背景技术

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC，以下简称肝癌)是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一。全球每年约有74万患者被新诊断为肝细胞癌，同时约有69万患者死于肝癌。其中我国占到了全球每年新发病例的55％，成为全世界肝癌最高的地区之一。

环状RNA(circular RNA，circRNA)是区别于传统线性RNA的RNA家族新成员，是不具有5’末端帽子和3’末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子。最新研究表明circRNA具有闭合环状结构，主要通过非典型可变剪切加工产生，广泛存在于各种生物细胞中，具有结构稳定，难以被RNase R酶降解、表达丰度高、物种间保守性好、表达具有组织及时空特异性等特征，这些特点使得circRNA在新型疾病诊断与治疗方法的开发应用上具有广阔的前景。

外泌体(exosome)是脂质双分子层膜性囊泡，是由活细胞内多泡体(multivesicular body，MVB)与细胞膜融合后释放到细胞外隙或生物体液中，大小介于30～100nm之间，包含有蛋白质、RNA、microRNA和DNA片段等多种成分，可以调节受体细胞行为，可作为生物标志物用于诊断人类疾病。外泌体在外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等体液中具有很高的丰度。复旦大学肿瘤研究所的黄胜林及何祥火课题组首次发现了外泌体内含有大量circRNA，外泌体中的circRNA比外泌体来源细胞中的circRNA丰富得多。血清外泌体也含有大量完整稳定的circRNA，并且结直肠癌病人血清外泌体中的circRNA与正常人差异明显，肿瘤来源的exo-circRNA有望成为癌症检测的潜在生物标志物。肿瘤来源或肿瘤相关的外泌体是调控肿瘤发生发展的重要机制，对肿瘤外泌体的分析和检测可以辅助肿瘤的早期诊断、疗效评价和预后分析。

circ-PTGR1a(CircBase ID：hsa_circ_0003731)其在基因组上的定位为：chr9:114341075-114348445，相应的线性基因为PTGR1(NM_001146108)，环化序列有442个碱基，包含PTGR1基因的第五、第六和第七个外显子。circ-PTGR1b(CircBase ID：hsa_circ_0008043)其在基因组上的定位为：chr9:114332370-114348445，相应的线性基因为PTGR1(NM_001146108)，环化序列有670个碱基，包含PTGR1基因的第五、第六、第七、第八和第九个外显子。circ-PTGR1c(CircBase ID：hsa_circ_0088030)，其在基因组上的定位为：chr9:114337013-114348445，相应的线性基因为PTGR1(NM_001146108)，环化序列有643个碱基，包含PTGR1基因的第五、第六、第七和第八个外显子。有报道PTGR1在肝癌中表达上调。

发明内容