[发明专利]一种鉴别窖泥窖龄的方法

说明书

本发明公开了一种鉴别窖泥窖龄的方法，基于窖泥主导微生物群落的代谢指纹图谱聚类分析，通过窖泥窖龄自动化鉴别系统实现自动化鉴别，操作简便，准确性高，能科学地鉴别窖泥质量及成熟度，为促进新窖老熟及老窖的维护保养等提供了科学依据。

技术领域

本发明属于酿酒技术领域，具体涉及一种鉴别窖泥窖龄的方法。

背景技术

白酒是五千年中华文明留下来的宝贵遗产，是中华传统文化的重要组成。在浓香型白酒固态发酵酿酒工艺中，窖池是关键设备。“千年老窖万年糟，酒好全凭窖池老”表明：只有窖龄较长的窖池才能酿出好酒。但对于窖池窖龄的鉴定仍然停留在以感官鉴定为主，同时检测相应理化指标。该方法存在主观性高、检测过程复杂、准确性低的缺陷，而理化指标值大小可以通过工艺简单调整就可达到，而且不同生产白酒企业人工窖泥培养方式及配方不尽相同，仅通过理化指标检测和感官进行鉴定是不客观的。

在白酒酿造过程中，参与酿酒发酵的主要是丰富复杂的窖泥微生物，我们应该从不同窖龄窖泥微生物群落结构和主导微生物群系及代谢特征入手，建立窖泥窖龄鉴别的方法，以科学的评估窖泥质量及窖龄鉴定，有效指导窖泥保养技术，提高白酒优质品率。

发明内容

为了解决上述问题，本发明基于窖泥功能基因微生物优势菌群，提供了一种鉴别窖泥窖龄的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

1）窖泥功能基因微生物优势菌群的确立，在确立过程中，首先进行窖泥样品总RNA提取，随后进行基因组数据处理；

2）窖泥主导微生物群系代谢指纹数据的收集，不同窖龄窖泥主导微生物代谢指纹数据通过预处理、培养和聚类进行采集；

3）通过大量的基础试验数据，建立窖泥窖龄聚类标准图谱；

4）通过采集不同车间的窖泥样品，将车间样品的聚类分析结果与各车间样品的实际窖龄进行比对，实现窖泥窖龄聚类标准图谱的验证。

进一步地，所述步骤1）中所述基因组数据处理包括DNA片段统计和拼接、生物信息解释、基因表达分析。

进一步地，通过宏基因组测序，比对不同窖龄窖泥间的微生物相对丰度及多样性指数,得出窖泥的主导微生物群落。

进一步地，所述基因组数据处理中同时利用Newbler软件和SOAPdenovo软件进行基因组的组装，使得拼接操作覆盖尽可能宽的丰度范围。

进一步地，所述基因组数据处理中结合MG-RAST软件或Kraken软件进行生物信息学数据分析。

进一步地，所述步骤2）中所述培养是将样品接种到Biolog ECO MicroPlate生态板，经过培养后放入Biolog微生物鉴定仪读取特征代谢指纹图谱信息。

进一步地，所述步骤2）中所述聚类通过SPSS统计分析软件处理特征代谢指纹图谱信息，得出待检窖泥样代谢指纹聚类分析图谱。

进一步地，所述方法还包括步骤5）基于Java构建窖泥窖龄自动化鉴别系统，通过SPSS软件和Biolog微生物鉴定仪提供的Java接口实现SPSS软件、Biolog微生物鉴定仪与系统核心控制模块之间的数据/控制命令交互，实现系统核心控制模块与ERP企业管理系统的数据连接。

进一步地，所述窖泥窖龄自动化鉴别系统的运行过程为：

（1）实验人员利用Biolog ECO MicroPlate生态板采集待检测窖泥的微生物样本，然后放入Biolog微生物鉴定仪读取特征代谢指纹图谱信息；

（2）系统通过Java接口自动获取检测信息，将信息通过Java接口传输给SPSS软件，同时传输对应的统计分析命令给SPSS软件；