[发明专利]npm靶向shRNA干扰库及其应用

说明书

本发明公开了一种npm靶向shRNA干扰库及其应用，该干扰库由四种shRNA组成，所述的四种shRNA的具体序列为：5'‑TGACTGACCAGGAGGCTATTCAA‑3'，5'‑TATGGAATGTTATGATAGGACA‑3'，5'‑TGATGAAAATGAGCACCAG‑3'，5'‑CTCCTGGAGGTGGTAACAAG‑3'。本发明的发现npm在胰岛素抵抗的肝脏组织中存在明显的高表达，并且其高表达主要受饱和脂肪酸的刺激作用。因此，本发明采用shRNA干扰的方式特异性抑制肝脏中npm基因的表达，经小鼠试验证实，干扰npm可以明显抑制高脂饮食诱导的胰岛素抵抗，小鼠的糖耐量也得到明显的改善，从而证明了干扰肝脏中npm的表达可以抑制小鼠的胰岛素抵抗，明显改善糖尿病病人的血糖控制能力。

技术领域

本发明属于基因药物技术领域，具体涉及一种npm靶向shRNA干扰库及其应用。

背景技术

核磷蛋白(nucleophosmin，npm)是人体内一个多功能蛋白，与细胞应激、慢性炎症发生、代谢调控、细胞存活和增殖均有密切的联系。npm是广泛表达的蛋白，在肝脏、肾脏、胸腺、肌肉、大脑和脂肪等多种组织中均存在较高的表达。有研究表明，npm参与有丝分裂的进程，其表达缺失可以导致细胞有丝分裂的失败和细胞增殖的停滞。并且，npm可以促进p53在核内的稳定性和转录活性，从而促进了细胞凋亡的发生进程。npm还可以通过调控炎症关键转录因子NF-kappaB，从而参与慢性炎症的发生和进程。此外，npm和细胞氧化应激、细胞内能量代谢之间也存在潜在的联系，从而表明npm可能广泛参与人体疾病的发生发展进程。以往的研究发现npm是导致急性髓细胞样白血病的一个重要致病基因，npm的缺失、突变以及和一些癌蛋白的融合表达产物如npm-ALK、npm-RARα和npm-MLF1是导致急性髓细胞样白血病发生的致病原因，这些研究发现提示其作为药物治疗靶点具有良好的应用前景。但是，目前npm和疾病的研究目前主要集中在肿瘤领域，关于npm作为糖尿病治疗靶点的研究仍然是空白。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种npm靶向shRNA干扰库，采用shRNA干扰的方式特异性抑制肝脏中npm基因的表达，满足使用需求。本发明的另一目的是提供一种上述的npm靶向shRNA干扰库的应用。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

npm靶向shRNA干扰库，由四种shRNA组成，所述的四种shRNA的具体序列如下：

5'-TGACTGACCAGGAGGCTATTCAA-3'，

5'-TATGGAATGTTATGATAGGACA-3'，

5'-TGATGAAAATGAGCACCAG-3'，

5'-CTCCTGGAGGTGGTAACAAG-3'。

所述的npm靶向shRNA干扰库在干扰npm基因中的应用。

所述的npm靶向shRNA干扰库在制备改善糖尿病肝脏胰岛素抵抗药物中的应用。

所述的npm靶向shRNA干扰库在制备用于血糖控制药物中的应用。

有益效果：与现有技术相比，本发明的发现npm在胰岛素抵抗的肝脏组织中存在明显的高表达，并且其高表达主要受饱和脂肪酸的刺激作用。因此，本发明采用shRNA干扰的方式特异性抑制肝脏中npm基因的表达，经小鼠试验证实，干扰npm可以明显抑制高脂饮食诱导的胰岛素抵抗，小鼠的糖耐量也得到明显的改善，从而证明了干扰肝脏中npm的表达可以抑制小鼠的胰岛素抵抗，明显改善糖尿病病人的血糖控制能力。

附图说明

图1是正常饮食和高脂诱导的糖尿病小鼠的肝脏组织中npm的相对表达结果图；