[发明专利]一种白色发光的上转换纳米颗粒及基于其的同时实现多组分肿瘤标志物检测的试纸条

权利要求书

1.一种同时实现多组分肿瘤标志物检测的试纸条，包括加样区、标记复合物结合区、检测区、质控区及手持区，其特征在于：在所述标记复合物结合区固定有白色发光的上转换纳米颗粒，在所述上转换纳米颗粒上标记有待检测的多种肿瘤标志物的抗体；在所述检测区的不同区域设有与待检测的肿瘤标志物抗体的种类数量相同的若干条检测T线，各检测T线上分别包被有一种待检测的肿瘤标志物的抗体，且各肿瘤标志物的抗体以不同颜色的荧光染料进行修饰；在所述质控区设有质控C线，在所述质控C线上包被有羊抗鼠IgG抗体；

使用时，将待检测试样滴加在所述加样区，若所述待检测试样中存在与标记复合物结合区上转换纳米颗粒上所修饰的多种肿瘤标志物的抗体相对应的抗原，则该抗原与上转换纳米颗粒上标记的相应抗体结合，一同进入检测区并部分固定在检测区相应的T线上，其余部分随待检测试样流入质控区；检测完成后，通过980nm激光激发，观察T线和C线的颜色变化，以判断待检测试样中所存在的肿瘤标志物，实现待检测试样中所含肿瘤标志物种类的定性检测；

所述白色发光的上转换纳米颗粒具有三层核壳结构，以掺杂有Yb、Tm和Er的NaGdF₄纳米颗粒为内核，在所述内核外包裹有Eu掺杂的NaGdF₄第一壳层，且在所述第一壳层外包裹有NaYF₄第二壳层，构成Yb、Tm、Er和Eu共掺杂的NaGdF₄:Yb/Tm/Er@NaGdF₄:Eu@NaYF₄核壳结构；所述的上转换纳米颗粒在近红外光激发下发出蓝、绿、红三基色光，总体显示白光发光；利用所述上转换纳米颗粒所具有的蓝、绿、红三个波段的发光，使一个波段、任意两个波段的组合、及三个波段各对应一种肿瘤标志物的检测，共可实现7种肿瘤标志物的同时检测。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于：在加样区滴加已知浓度的系列标准抗原溶液，进行检测；检测完成后，通过980nm激光激发，获得检测区相应T线与质控区C线的荧光强度，并建立T线和C线荧光强度比值与抗原浓度的标准曲线，以实现待检测试样中所含肿瘤标志物浓度的定量检测。

3.一种权利要求1或2所述试纸条的制作方法，其特征在于：

(1)样品垫的处理

以纤维素膜作为样品垫材料，将样品垫在样品垫处理液中浸泡不超过30min后，37℃烘干，完成样品垫的处理；

(2)结合垫的处理

以玻璃纤维素膜作为结合垫材料，首先将结合垫在结合垫处理液中浸泡不超过30min后，37℃烘干，然后再将结合垫放入标记有待检测的多种肿瘤标志物的抗体的白色发光的上转换纳米颗粒的溶液中浸泡不超过30min后，37℃烘干，完成结合垫的处理；

(3)硝酸纤维素膜的处理

将硝酸纤维素膜分为两部分；将待检测的各肿瘤标志物的抗体在第一部分的不同区域以1μL/cm的参数划线，形成若干条包被有一种肿瘤标志物的抗体的检测T线，各肿瘤标志物的抗体以不同颜色的荧光染料进行修饰；将羊抗鼠IgG抗体在第二部分以2μL/cm的参数划线，形成质控C线；烘干，即完成硝酸纤维素膜的处理；

(4)试纸条的组装

从黏性塑料底板的前端向后端依次粘合处理后的样品垫形成加样区、粘合处理后的结合垫形成标记复合物结合区、粘合处理后的硝酸纤维素膜形成检测区和质控区、粘合吸水纸形成手持区，其中检测区位于标记复合物结合区和质控区之间。

4.根据权利要求3所述的制作方法，其特征在于：

步骤(1)所述的样品垫处理液为含有质量浓度0.05～10％BAS和0.1％～2％Tween-20的0.01M、pH＝7.0～8.0的PBS缓冲溶液；

步骤(2)所述的结合垫处理液为含有质量浓度0.05～10％BAS、0.1％～3％Tween-20和1％～10％蔗糖的0.01M、pH＝7.0～8.0的PBS缓冲溶液。