[发明专利]一种侧向流层析检测反应启动控制方法

说明书

本发明公开了一种侧向流层析检测反应启动控制方法，所述方法特征在于将加载液相的侧向流层析检测结构置于离心装置上，通过离心驱动液相进入固相检测膜并维持流动，进而启动侧向流层析检测反应，可用于胶体金属免疫层析检测方法、荧光免疫层析检测方法和化学发光免疫层析检测方法。本发明具有准确性高、重复性好、使用便捷、稳定性高、便于储存的特点。

技术领域

本发明涉及一种侧向流层析检测反应启动控制方法，属于免疫检测技术领域。

背景技术

免疫学检测技术是应用免疫学原理设计的测定抗原、抗体、免疫细胞及化学成分等的实验手段，广泛用于来源于人体和动物体可进行疾病诊断和健康检测的样品以及用于环境、药物分析、食品和工业分析的样品。常用的有免疫浊度技术、固相酶免疫测定技术、化学发光检测技术、免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术等。免疫浊度技术，也称免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，产生一定大小的复合物，形成光的折射或吸收，测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位，用于定量检测，但检测灵敏度低，不适合于微量检测。固相酶免疫测定技术基于抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性，抗原或抗体的酶结合物既保留其免疫学活性，又保留酶的活性，在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，具有灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，但检测反应时间长限制了其使用。免疫化学发光检测技术是一种高灵敏的微量及痕量分析技术，具有操作方便、灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，广泛地应用于环境、临床、药物分析、食品和工业分析中，也是基于抗原或抗体的固相分离手段及抗原或抗体的发光试剂标记技术，但检测反应时间长、检测试剂需要冷藏保存和运输及对检测设备的要求高影响其使用。免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术也是常用的检测技术被广泛使用，但均有其相应的不足，检测反应时间长或灵敏度、准确性和稳定性欠缺是普遍存在的不足。高灵敏度、快速、便捷、小型化、全定量、自动化是目前临床免疫检测技术产品的发展趋势，但现有的都无法同时实现上述功能。侧向流层析检测的自动化控制是实现上述检测功能的重要环节，而如何人为控制反应启动是实现侧向流层析检测自动化的关键技术。侧向流检测的现有技术在加载液体后检测反应就会立即启动，无法实现通过人为控制启动，这样严重限制了批量检测反应的自动化，因此，开发反应启动控制技术和方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种侧向流层析检测反应启动控制方法，所述方法特征在于将加载液相的侧向流层析检测结构置于离心装置上，通过离心驱动液相进入固相检测膜并维持流动，进而启动侧向流层析检测反应，具有如下特征：1）所述侧向流层析检测结构由包括液相承载结构、固相检测膜、支撑底片组成，其中液相承载结构和固相检测膜依次置于支撑底片上；2）所述液相承载结构与所述固相检测膜之间留有阻碍液相自然流动的间隙；3）使用时将侧向流层析检测结构置于离心装置上；4）所述液相位于液相承载结构内，且位于所述固相检测膜的近心侧；5）所述液相由所述离心装置离心驱动流经所述间隙，进入所述固相检测膜并维持流动。

上述的方法中，所述侧向流层析检测包括以胶体金属为指示剂的胶体金属免疫层析、以荧光素为指示剂的荧光免疫层析和化学发光物质和/或化学发光酶介导发光作为指示剂的化学发光免疫层析的至少一种。

上述的方法中，所述间隙为空气、过滤膜垫的至少一种。

上述的方法中，所述间隙宽度选择0.5-3mm，过滤膜垫的孔径选择0.1-5微米。所述间隙宽度优选0.5-2mm，所述间隙宽度更优选0.5-1mm。过滤膜垫的孔径优选0.1-3微米，过滤膜垫的孔径更优选0.1-1微米。

上述的方法中，所述离心驱动的离心装置转速选择50-500转/分钟，优选100-400转/分钟，更优选100-300转/分钟。