[发明专利]一种鉴定鳗鲡种质的引物、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201710935173.6 | 申请日： | 2017-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN107488736A | 公开（公告）日： | 2017-12-19 |
| 发明（设计）人： | 赖晓健;江兴龙;罗碧莲 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219 | 代理人： | 林祥翔,徐剑兵 |
| 地址： | 361021 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 鳗鲡 种质 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种鉴定鳗鲡种质的引物，其特征在于，包括以下4对引物中的一种或多种，所述4对引物序列为：
aj S1:TTATGGCTGATTCATCCGAAATT、aj A1 CCTGCTAATGGGTTGAGTACTAAA；
r-a S1 TGATGCTGACTTTGCCACTGAT；r-a A2 GTTCGTTCCCTTGAAAACCTTGT；
bp-m S5 TCCATACTTCTCATACAAAGACCTAT、bp-m A3 CTAGTCAACCTACTAATGGGTTTAAT；
m-a S4 CCGCCGTCCCATACGTAGGAG、m-a A4 TATTTTGTTTTCTAGTCAACCTACTAAT。
2.一种鉴定鳗鲡种质的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物。
3.一种鉴定鳗鲡种质的方法，其特征在于，包括如下步骤：
提取日本鳗鲡、美洲鳗鲡、花鳗鲡、太平洋双色鳗鲡、欧洲鳗鲡中任一苗种或烤鳗产品的基因组DNA；
用如权利要求1所述的引物对鳗鲡DNA样品进行PCR扩增；
根据琼脂糖凝胶电泳检测条带的大小或阴性阳性结果判断鳗鲡种质。
4.如权利要求3所述的鉴定鳗鲡种质的方法，其特征在于，所述步骤“对鳗鲡DNA样品进行PCR扩增”中的PCR反应条件具体包括：
94℃预变性5分钟；
27个循环的94℃变性45秒、58℃退火45秒、72℃延伸45秒过程；
72℃延伸5分钟。
5.如权利要求3或4所述的鉴定鳗鲡种质的方法，其特征在于，所述“根据琼脂糖凝胶电泳检测条带的大小或阴性阳性结果判断鳗鲡种质”具体包括：
引物对ajS1/ajA1的PCR结果为阳性者，判断为日本鳗鲡；
引物对r-aS1/r-aA2的PCR结果为阳性者，判断为美洲鳗鲡；
引物对bp-mS5/bp-mA3和m-aS4/m-aA4的PCR结果为阳性者，判断为太平洋双色鳗鲡；
引物对m-aS4/m-aA4的PCR结果为阳性者，判断为花鳗鲡；
引物对ajS1/ajA1、r-aS1/r-aA2、bp-mS5/bp-mA3和m-aS4/m-aA4的PCR结果均为阴性者，判断为欧洲鳗鲡。
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