[发明专利]一种杨桃多酚氧化酶的提取方法

说明书

本发明公开了一种杨桃多酚氧化酶的提取方法，该方法包括以下工艺步骤：称取100‑150g成熟杨桃果实，切成细块状，按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液，一起匀浆2min，而后放入4℃冰箱中浸提3h，取出用纱布过滤，再在2℃条件下离心15‑20min，收集上清液即为杨桃多酚氧化酶液。本发明实现后与现有技术相比具有成本低，杂质含量少，生产过程对环境无污染等优点。

技术领域

本发明涉及一种杨桃多酚氧化酶的提取方法，属于中药有效成分提取领域。

背景技术

杨桃是我国南方重要的热带水果之一，其果实具有丰富的营养价值和药理价值。近年来，杨桃栽培在广东、广西、福建等省发展迅速。但是，杨桃果实在贮藏和加工过程中容易发生酶促褐变，从而影响其外观品质和营养品质。

多酚氧化酶(PolyphenolOxidase，简称PPO)是果蔬体内普遍存在的一类含铜的氧化还原酶。果蔬组织中发生的褐变现象主要是由于PPO催化富含在果蔬中的酚类物质的氧化反应所引起的。因此，开展果蔬PPO的提取、纯化及其特性研究，受到了国内外学者的广泛关注。可是迄今为止，关于杨桃PPO的提纯与特性研究尚未见报道。为此，开展了杨桃PPO的提取研究，旨为今后进一步开展杨桃果实PPO的特性及其酶促褐变抑制等研究奠定基础。

发明内容

本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备杨桃多酚氧化酶的方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

a.称取100-150g成熟杨桃果实，切成细块状，按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液，一起匀浆2min。

b.而后放入4℃冰箱中浸提3h，取出用纱布过滤。

c.再在2℃条件下离心15-20min，收集上清液作为杨桃多酚氧化酶液。

步骤a中所述加入的磷酸盐缓冲溶液浓度为0.1mol/L，pH值7.0。

步骤c中所述离心机转速为10000r/min。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

称取100g成熟杨桃果实，切成细块状，按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液，一起匀浆2min。而后放入4℃冰箱中浸提3h，取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心15min，收集上清液作为杨桃多酚氧化酶液，其得率为80.01%。

实施例2：

称取100g成熟杨桃果实，切成细块状，按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液，一起匀浆2min。而后放入4℃冰箱中浸提3h，取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心20min，收集上清液作为杨桃多酚氧化酶液，其得率为79.6%。

实施例3：

称取150g成熟杨桃果实，切成细块状，按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液，一起匀浆2min。而后放入4℃冰箱中浸提3h，取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心20min，收集上清液作为杨桃多酚氧化酶液，其得率为82.3%。