[发明专利]高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法在审
申请号: | 201710942832.9 | 申请日: | 2017-10-11 |
公开(公告)号: | CN107653270A | 公开(公告)日: | 2018-02-02 |
发明(设计)人: | 卢志文 | 申请(专利权)人: | 广西南宁秀珀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12R1/01 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 | 代理人: | 靳浩 |
地址: | 530001 广西壮族自治区南宁市兴宁*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高密度 紫色 光合 细菌 发酵 累积 phb 方法 | ||
1.一种高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)在透明的密闭容器的外侧围绕着4组同轴设置的线圈,且中间两组线圈的间距为线圈半径的0.4864倍,两端两组线圈间距为线圈半径的1.8814倍,中间线圈箍数为与两端线圈箍数之比为2.2606,4组线圈相互串联并与电流调节器连接,所述电流调节器与电源开关电连接,获得发酵容器;
2)将发酵液添加到透明的发酵容器中,接种紫色非硫光合细菌并在白炽灯光照条件下进行密闭培养;
3)紫色非硫光合细菌的培养密度大于5×109个/mL时,往发酵容器中添加磁性发光材料、丙酮酸与亚硝基谷胱甘肽,并使亚硝基谷胱甘肽在发酵液中的浓度为0.1~0.3mg/L,打开所述电源开关使线圈在所述发酵容器内产生磁场,通过所述电流调节器调节电流的大小,使密闭容器内的磁感应强度为0.01~0.03T,培养2~3天后增大电流使密闭容器内的磁感应强度为0.05~0.07T,持续培养,培养结束后过滤发酵液获得滤出物,所述滤出物重悬浮于蒸馏水中,调节pH至5~6后进行高速搅拌,搅拌结束后使用滤布过滤,收集滤液获得高PHB含量的紫色非硫光合细菌。
2.根据权利要求1所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,将丙酮酸4.00~6.00g,(NH4)2SO4 1.00~2.00g,KH2PO4 1.00~2.00g,K2HPO4.3H2O 1.00~2.00g,MgSO4.7H2O 120~180mg,CaCl2.2H2O 75~100mg,EDTA 20~40mg,VB1 1~3mg,烟酸1~3mg,维生素H 15~30ug,H3BO3 2.8~4.5mg,ZnSO4.7H2O 240~300ug,MnSO4.H2O 1.6~3.2mg,Cu(NO3)2.3H2O 40~60ug,Na2MoO4.2H2O 750~900ug,溶解于1000mL蒸馏水中,调节pH至7.5-8.5,获得所述发酵液。
3.根据权利要求1所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,所述紫色非硫光合细菌的接种量为培养液总体积的25%~40%。
4.根据权利要求1所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,所述白炽灯的光照强度为3000~5000Lux。
5.根据权利要求1所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,将氧化铯、氧化铟、五氧化二钒与氧化钇混合均匀,置于坩埚中在1300~1600℃下煅烧2~3h,冷却后,取出进行高能球磨,获得纳米发光材料;将所述纳米发光材料添加到氯化亚铁与氯化铁的溶液中,在高速搅拌条件下添加氨水,之后高速离心获得沉淀,所述沉淀洗涤至中性后在50~60℃条件下干燥,在干燥的所述沉淀中添加环氧树脂粉末,搅拌均匀,加热至250~300℃,保温5~10min后添加固化剂并搅拌均匀,保温5~10min,冷却至室温后进行高能球磨,获得粒径为0.05~0.1mm的所述磁性发光材料。
6.根据权利要求5所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,氧化铯、氧化铟、五氧化二钒与氧化钇混合的摩尔质量比为0.1~0.3:3~5:1~2:1~2。
7.根据权利要求5所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,所述氯化亚铁与氯化铁的摩尔质量比为1:2~3。
8.根据权利要求5所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,所述环氧树脂粉末与所述沉淀的质量比为1:50~100。
9.根据权利要求1所述的高密度紫色非硫光合细菌发酵累积PHB的方法,其特征在于,步骤3)中磁性发光材料的添加量为发酵液总质量的2%~4%;丙酮酸的添加量为发酵液总质量2.5%~5%。
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