[发明专利]雨声红球藻的培养方法

权利要求书

1.一种雨声红球藻的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)构建培养容器：所述培养容器包括：

生长容器，其为透明材料制成的圆柱形密闭容器，所述生长容器的顶部设置有第一通孔和进料孔，底部设置有第一开口，所述生长容器靠近顶部的侧壁上设置有第二通孔；

累积容器，其为透明材料围绕着所述生长容器的外侧形成的圆柱形的密闭容器，所述累积容器与所述生长容器一起构成环状密闭空腔，所述累积容器的顶部设置有进料孔，所述累积容器靠近底部处设置有第一排料孔；

收集装置，其包括电场发生装置和收集容器，所述收集容器为透明材料制成；所述电场发生装置包括阳极、阴极和直流电源，所述阳极设置在所述收集容器内，所述阴极设置在所述生长容器内部的上端，所述阳极与阴极经过电源开关后和所述直流电源电连接形成回路，所述收集容器为透明材料制成的密闭容器，所述收集容器设置在所述生长容器下方，所述收集容器的顶部设置有第二开口，所述第二开口与所述第一开口通过管道开关连通；所述收集容器的底部设置有第二排料孔，所述第二排料孔通过导管与水泵的进水口连接，所述水泵的出水口通过导管与所述进料孔连接以将收集容器中的液体泵入所述累积容器，所述收集容器设置有气压平衡装置；

曝气装置，所述曝气装置包括曝气泵、累积容器曝气管和收集容器曝气管，所述累积容器曝气管和收集容器曝气管分别位于累积容器和收集容器的底部，所述累积容器曝气管和收集容器曝气管与所述曝气泵连通；

2)消毒：往所述培养容器内通入臭氧进行灭菌；

3)生长培养：往所述生长容器中添加培养液，接种雨声红球藻藻种进行持续培养；

4)累积培养：打开所述电源开关，使电场发生装置发生电场将雨声红球藻细胞聚集到收集容器中，关闭所述管道开关并关闭电源开关，启动所述水泵将收集容器中的藻液泵入累积容器中，持续培养，获得所述雨声红球藻。

2.如权利要求1所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述生长容器的直径为40～70cm。

3.如权利要求1所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述第一通孔内设置有0.22μm滤膜。

4.如权利要求1或2所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述累积容器的外径比所述生长容器的外径大5～10cm。

5.如权利要求1所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，步骤2)中通入100～150mg/L的臭氧20～30min。

6.如权利要求1所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述培养液包含硝酸钾30～50mg/L，硫酸镁40～50mg/L，大蒜素30～50mg/L，磷酸氢二钾10～15mg/L，EDTA-2Na 10～15mg/L，维生素B1 6×10^-3～10×10^-5mg/L，维生素12 6×10^-5～10×10^-5mg/L，硫酸亚铁2.5～5mg/L，碳酸氢钠100～150mg/L，硫酸锰0.25～0.5mg/L，小分子肽提取液20～30mL/L。

7.如权利要求6所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述小分子肽提取液的制备方法为：往柠檬酸缓冲液中添加大豆分离蛋白，搅拌均匀，并使用超声波作用10～20min后添加木瓜蛋白酶和中性蛋白酶处理30～50min，在80～90℃下进行灭活20～30min，离心获得上清液即为小分子肽提取液。

8.如权利要求1所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，步骤4)中，往累积容器中添加活性钙，添加量为培养液总质量0.5％～1％。

9.如权利要求8所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，将鸡蛋壳浸泡在醋酸溶液中，待鸡蛋壳完全溶解后调节pH至6～7，并进行过滤灭菌后获得所述活性钙。

10.如权利要求1-3或5-9任一项所述的雨声红球藻的培养方法，其特征在于，所述生长容器和累积容器的内表面均覆盖有聚四氟乙烯薄层。