[发明专利]一种快速鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的PCR检测试剂盒

说明书

本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种快速鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的PCR检测试剂盒。所述试剂盒中包括SPUL_2693基因检测引物对，所述SPUL_2693基因检测引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物。本发明的试剂盒能快速高通量鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌，可作为沙门菌传统血清学分型的辅助方法，并为鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的监测与实验室诊断提供了一种简单快速、灵敏性高的新方法。

技术领域

本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种快速鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的PCR检测试剂盒。

背景技术

沙门菌病是公共卫生学上有重要意义的传染病之一，其病原沙门菌属于肠杆菌科，蛋、家畜和肉制品是主要传播媒介，可引起多种畜禽疾病，造成全身性败血症和肠炎。鸡白痢和鸡伤寒分别是由鸡白痢沙门菌(Salmonella Pullorum)和鸡伤寒沙门菌(Salmonella Gallinarum)引起的。鸡白痢沙门菌，又称雏沙门菌，可引起禽的鸡白痢(pullorum disease)，多侵害3周龄以内幼雏，发病率和病死率较高；对日龄较大的青年鸡也可致病和致死，成年鸡亦可被感染，常导致母鸡产蛋减少，生殖道畸形，体质量下降，也导致孵化率和出雏率明显下降且可长期带毒与排毒。禽伤寒(fowl typhoid)是因感染鸡伤寒沙门菌而导致的急性或慢性败血性禽类传染病，表现出腹泻、厌食、精神不振等症状，鸡伤寒沙门菌对雏鸡、成年鸡均可致病，以引起贫血、白细胞增多、出血为特征。在全球范围内影响着养鸡业的发展，在我国颇为严重。因而，鸡白痢/鸡伤寒沙门菌是我国养鸡业中危害严重的细菌，能引起严重的经济损失。目前，根据Kauffman-White(K-W)血清型分型方法，依据沙门菌菌体抗原及鞭毛抗原的不同，沙门菌目前的血清型有2600种以上，我国已报道了292种不同的血清型，分属于35个O群。

传统的检测方法包括非选择性和选择性增菌、生化特性及血清学鉴定等步骤。过程繁琐、费力、耗时，需4-7天才能完成，相比于其它鉴定方法如抗体检测法，虽快速，但其假阳性使之不适于常规检测。因此，急需一些快速、特异、敏感的检测方法，以及时发现鸡白痢/鸡伤寒沙门菌，这对于鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的有效防控意义重大。

发明内容

针对现有技术中所存在的问题，本发明的目的在于提供一种快速鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的PCR检测试剂盒及其制备和应用。

为了实现上述目的及其他相关目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供SPUL_2693在制备或筛选鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂中的用途。

将SPUL_2693用于制备鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂，是指将SPUL_2693作为基于检测SPUL_2693含量的鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂的标准品或阳性对照，用于SPUL_2693的检测。

将SPUL_2693用于筛选鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂，是指将SPUL_2693作为检测靶标应用于鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂的筛选。在本发明的一些实施方式中，基于所述的SPUL_2693的基因序列，筛选特异性针对SPUL_2693的PCR扩增引物对从而作为鸡白痢/鸡伤寒沙门菌检测试剂。

本发明的第二方面，提供一种快速鉴定鸡白痢/鸡伤寒沙门菌的PCR检测试剂盒，所述试剂盒中包括SPUL_2693基因检测引物对，所述SPUL_2693基因检测引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物。

本发明的试剂盒采用PCR检测技术进行SPUL_2693基因检测，根据扩增及检测情况可判断检测对象是否属于鸡白痢/鸡伤寒沙门菌。因此，引物对的设计是本发明试剂盒的关键。