[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒弱毒株、其培养方法及应用有效
申请号: | 201710948069.0 | 申请日: | 2017-10-12 |
公开(公告)号: | CN107619822B | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
发明(设计)人: | 刘惠莉;陶洁;李本强;程靖华;石迎 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K39/215;A61P31/14 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 杨昀 |
地址: | 201106 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 流行性 腹泻 病毒 弱毒株 培养 方法 应用 | ||
1.一种猪流行性腹泻病毒弱毒株,名称为猪流行性腹泻病毒JS/PEDV/2/2014G100,保藏编号CCTCC NO.V201728,该弱毒株的辅助基因ORF3比PEDV强毒株的ORF3缺失49个核苷酸,其核苷酸序列与如SEQ ID NO.1所示序列有至少99.8%的同源性,且其在Vero细胞上的增殖不依赖于胰酶。
2.根据权利要求1所述猪流行性腹泻病毒弱毒株,其特征在于,其S基因氨基酸序列与如SEQ ID NO.2所示序列有至少98.1%的同源性。
3.一种猪流行性腹泻病毒弱毒株的培养方法,包括如下步骤:
将0.5-1MOI如权利要求1或2所述的猪流行性腹泻病毒弱毒株JS/PEDV/2/2014G100接种于Vero细胞,吸附1-2h后,弃去细胞上清,加入含有1-3%FBS的DMEM培养液,培养60-72h,收集细胞培养液,获得所述猪流行性腹泻病毒弱毒株。
4.根据权利要求3所述猪流行性腹泻病毒弱毒株的培养方法,其特征在于,将收集的细胞培养液保存于-40℃以下,备用。
5.一种猪流行性腹泻弱毒候选疫苗,其包含权利要求1或2所述的猪流行性腹泻病毒弱毒株。
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